南极帽贝(Nacella concinna)的营养价值评定及蛋白聚糖的初步研究

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本文以南极乔治王岛菲尔德斯半岛南极帽贝(Nacella concinna)、浙江南麂列岛国家海洋自然保护区竹屿岛斗嫁(?)(Cellana grata)为研究对象,分析比较了两种贝类的营养成分,并进行全面评价。从南极帽贝(N. concinna)的水溶性粗提物(CE)中分离纯化出南极帽贝蛋白聚糖(NCPG),并对其结构、理化性质以及抗氧化活性进行了初步的研究。主要研究结果如下:(1)南极帽贝蛋白质含量高达66.88%,是一种优质的蛋白源。钙、镁、铁、锌等矿质元素含量丰富。南极帽贝中镉的含量是斗嫁(?)镉含量的十倍之多,但这并未超出国家关于贝类重金属镉(≤2 mg/Kg)残留量的限量标准。南极帽贝脂肪酸含量丰富,不仅含有较多的人体必需不饱和脂肪酸,而且还含有2.81%的牛磺酸,此含量与海参、江瑶贝相比相对较高。南极帽贝经氨基酸分析仪检出18种氨基酸,其中,必需氨基酸所占的比例达42.03%,与FAO/WHO(联合国粮农组织/世界卫生组织)(1973)提出的评分模式较为接近,含量最高的氨基酸为谷氨酸,第一限制性氨基酸是色氨酸。对南极帽贝的营养价值进行评定,可知南极帽贝的必需氨基酸指数(EAAI)、生物价(BV)、营养指数(NI)和氨基酸比值系数分(SRCAA)分别为58.39%、51.95%、39.05%和81.04%。(2)采用常用方法热水浸提法从南极帽贝中提取蛋白聚糖,得率为12.07%,用苯酚-硫酸法测得粗提物(CE)中糖含量为70.36%,考马斯亮蓝法测得粗提物中蛋白含量为33.72%。粗提物(CE)经Sephacryl S-400 HR凝胶过滤层析后,得到四个洗脱峰P1、P2、P3和P4,其中,P1和P4由于得率极低,未进行收集和进一步研究。对于P2和P3,通过体外抗氧化活性研究后发现,P2对不同自由基的清除能力明显大于P3,因此,将冷冻干燥后的P2经Superose 12凝胶柱进一步分离纯化。P2经Superose 12凝胶过滤层析后,得到两个洗脱峰P21和P22,收集洗脱峰P22,透析脱盐后冷冻干燥,得到纯化的南极帽贝蛋白聚糖NCPG。(3)液相色谱法测得NCPG的分子量大小约为24 kDa;利用气相色谱分析仪对NCPG单糖组成进行分析,结果表明,NCPG中的糖链主要由葡萄糖和半乳糖组成,此外,还含有少量的鼠李糖、阿拉伯糖以及甘露糖;NCPG的紫外光谱分析结果显示,经NaOH处理过的NCPG在240 nm处的紫外吸收值比未经NaOH处理过的NCPG紫外吸收有所增强,说明该物质分子中存在O-型糖肽键;NCPG的红外光谱分析显示,南极帽贝蛋白聚糖在2930 cm-1、1230 cm-1、1654 cmcm-1、 1540 cm-1、582 cm-1处都有吸收峰,而这些吸收峰又都是糖和蛋白质的特征吸收峰,证明NCPG是一种糖和蛋白质的复合物。NCPG在1110 cm-1处的吸收峰说明其分子中含有毗喃糖;体外清除自由基活性研究表明,NCPG对DPPH·、·OH以及O2·具有一定的清除能力,但都比相同浓度条件下的抗坏血酸的清除能力弱,而且在一定浓度范围内,NCPG对自由基的清除能力随着浓度的增大而增强。NCPG在清除三种不同自由基的作用中,对羟基自由基的清除能力最强,达到60%以上,而对DPPH自由基和超氧阴离子自由基的清除能力大小相差不大,仅有35%左右。
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