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非特异性核酸酶能非特异性地降解几乎所有形式的核酸，用途广泛。来自a菌的非特异性核酸酶，不仅具有非特异性，而且具有热稳定性及广泛的适用性。但目前国内外关于其相关报道甚少。为此，本论文将首先明确Y.e.p-Nuc的核苷酸序列，然后将Y.e.p-Nuc基因克隆至原核表达载体，利用大肠杆菌表达系统获得功能性重组Y.e.p。本论文主要获得以下结果: 1.利用已知Y.e.e非特异性核酸酶基因的侧翼序列，做同源分析，蛋白质序列比对，找到保守序列，设计兼并引物，扩增出Y.e.p非特异性核酸酶片段，从而明确了Y.e.p非特异性核酸酶的核苷酸序列; 2.利用大肠杆菌原核表达系统，构建了Y.e.p非特异性核酸酶高产菌株，质粒载体xx转入xx表达效果最好; 3.将重组载体导入xx菌株，经IPTG诱导实现了胞内表达32 kDa左右的融合蛋白，其最佳诱导表达条件为诱导温度32℃，IPTG浓度1.5 mM，细胞密度OD6000.80，诱导时间20.5 h。BCA法测得蛋白浓度为1.5 mg/mL。利用Ni-NTA亲和层析柱纯化获得重组蛋白。 4.重组Y.e.p-nuc的酶活性研究表明:(1)该酶最适温度55℃，最适pH为7.0;(2)对核酸酶酶活激活作用最大的为镁离子，其次为钡离子、钙离子、钠离子、铜离子，且低浓度的亚铁离子、钾离子对其也有一定的激活作用，但是较高浓度的锌离子、锰离子、镍离子、钴离子、钾离子及亚铁离子等则对其有一定的抑制作用;(3)该酶在37℃下很稳定，随着温度升高稳定性逐渐降低，100℃处理5h后仍有16％左右的残余酶活，说明其耐热性较好;(4)在pH3.8-9.8条件下稳定性较好。在pH7.0时酶活基本不变，酸性条件下稳定性较好，碱性条件下稳定性相对略低，但在pH9.8的条件下处理5h后仍有83.3％的残余酶活。(5)2-50 mM浓度的SDS对其稳定性影响较小，而100-500 mM浓度下影响较大，甚至完全抑制其酶活。2-10 mM EDTA对其稳定性影响较小。