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目的：探讨红芪多糖(HPS)对小鼠脾淋巴细胞的免疫调节作用及蛋白表达图谱的影响。方法：1.制备正常小鼠脾淋巴细胞悬液,用MTT法检测红芪多糖对小鼠脾淋巴细胞的刺激增殖作用,流式细胞术检测CD3+T淋巴细胞以及CD4+和CD8+T淋巴细胞比例,ELISA试剂盒测定培养上清中的IL-2、IL-4、INF-γ含量。2.制备正常小鼠脾淋巴细胞悬液,分为HPS组和对照组,培养72小时后,采用标准裂解法提取脾淋巴细胞总蛋白,并用丙酮沉淀法对提取的脾淋巴细胞蛋白进行纯化,比较丙酮沉淀法纯化前后的的蛋白样品所得2-DE图谱,验证丙酮沉淀法是否适用于脾淋巴细胞蛋白的制备,同时对第一相等电聚焦电泳条件进行优化,银染显色后比较各凝胶图像。3.采用方法2优化后的双向电泳方法分离脾淋巴细胞蛋白,银染显色,PDQuest8.0软件对凝胶图谱进行差异点分析,找出差异明显的蛋白质点。结果：1.MTT实验结果表明：培养72h后,40、80、100、200μg/ml的红芪多糖均能显著的促进脾淋巴细胞的增殖(P<0.05),且100μg/ml寸作用最强,故选用终浓度为100μg/ml作为干预浓度,用于后续实验；HPS干预后,CD3+总T淋巴细胞百分比增加(P<0.05),且CD3+CD8+T淋巴细胞比例上调(P<0.01)；细胞培养上清检测显示：IL-2含量增加(P<0.01),INF-γ增加(P<0.05),而IL-4含量减少(P<0.05)。2.丙酮沉淀法能够增加蛋白的溶解性,增加蛋白点数目,同时对等电聚焦程序的优化,也使得2-DE图谱的纵向和横向拖尾显著减少,蛋白质点分离良好,2-DE图谱分辨率提高。3PDQuest8.0软件分析HPS组和对照组的2-DE图谱,结果显示：HPS组中共有16个蛋白点发生明显改变,其中11个蛋白质点高表达,4个蛋白质点消失,1个蛋白质点低表达。结论：1.HPS能够调节脾淋巴细胞的免疫功能,增加IL-2分泌,且能诱导Thl细胞分化,以增强细胞免疫应答能力为主。2.标准裂解法结合丙酮沉淀法适用于小鼠脾淋巴细胞蛋白的提取和纯化,利用优化后的双向电泳方法获得了HPS作用小鼠脾淋巴细胞蛋白的2-DE图谱。3.HPS能显著影响正常小鼠脾淋巴细胞蛋白质的表达。