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本实验运用膜片钳细胞吸附式和全细胞记录的方式对RA核团神经元的电生理学特性进行了探究。
(1)运用细胞吸附式电压钳技术,在gap—free模式下,我们观察到了RA核团的神经元有自发动作电位的发放。每个发放都为双向,即都是由一个下降相和接着的一个上升相组成。每一个发放代表细胞发生了一次兴奋。神经元自发放频率的大小可表示神经元兴奋性的高低。
(2)实验中在灌流的ACSF中直接加入GABA的阻断剂(PTX)。比较正常组、加药组和洗脱后实验组的自发放频率,P>0.05,各组间无明显差异。说明PTX对RA神经元的自发放频率没有显著的影响。这表明这种自发放是神经元的一种内在电生理学特性,而不受GABA递质的影响。
(3)实验中记录了9、10月份雌雄斑胸草雀RA核团神经元的自发放频率。结果显示,雄性斑胸草雀的平均发放频率为12.84Hz,而雌性的发放频率平均只有7.06 Hz。单因素方差分析雌雄鸟自发放频率之间存在显著性差异。且雌雄斑胸草雀RA核团内神经元自发放频率的分布不同,雄鸟RA核团神经元均有一定频率的发放,部分神经元的自发放频率超过13Hz。而雌鸟RA核团神经元的自发放频率相对较低,甚至有一些神经元没有自发放。这些结果为鸣禽性别二态性的研究在电生理学方面提供了新的证据。
(4)细胞吸附式下的结果表明,RA核团中存在两种发放类型不同的神经元:Ⅰ型神经元和Ⅱ型神经元。进一步破膜形成全细胞式后的记录结果表明:这两类细胞的其它电生理特性也存在显著差异。其中,Ⅰ型神经元在自发状态下表现出规律的动作电位发放;动作电位后超极化潜伏期及其恢复过程均较长,输入阻抗和时间常数较大。而Ⅱ型神经元在自发状态下很少有动作电位的发放,动作电位后超极化潜伏期和恢复过程较短,输入阻抗和时间常数较小。这些电生理学特性与已报道的细胞内记录的投射神经元和中间神经元很相似。依据这些特性鉴定Ⅰ型神经元为投射神经元,Ⅱ型神经元为中间神经元。