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本研究分三部分。第一部分建立了白质消融性白质脑病的分子诊断方法。白质消融性白质脑病(1eukoencepha1opathy with vanishing white matter，VWM)由真核细胞翻译启动因子2B(eukaryotic translation initiation factor2B，eIF2B)基因缺陷所致。eIF2B由eIF2Bα、eIF2Bβ、eIF2Bγ、eIF2Bδ、eIF2Bε5个亚单位组成，相应编码基因分别为EIF2B1、EIF2B2、EIF2B3、EIF2B4、EIF2B5。本研究同时建立从外周血RNA途径和DNA途径检测上述5个基因突变的方法，并应用于一个临床表现典型的VWM患者。结果显示：RNA途径仅在EIF2B5基因发现一呈杂合状态的多态性位点c.2123A＞G(p.L587V)；DNA途径在EIF2B2基因发现两个碱基改变：intron3.c.515+43C＞A，c.1304G＞C，EIF2B3基因发现intron4.c.661﹣35A＞G。 第二部分利用长链RT-PCR结合T克隆-测序的方法，发现人EIF2B4基因的一个新型可变剪接产物。在一个具有典型临床表现的VWM患者外周血EIF2B4基因转录产物中发现一部分产物外显子7的5端缺失26bp，为一个可变剪接3’位点新型可变剪接产物。针对新发现的剪接位点，本研究对其它物种的 EIF2B4基因进行保守性分析，并对人EIF2B4基因可能的剪接变异体进行预测。结果显示：人EIF2B4基因外显子7的5端长26 bp与猕猴、黑猩猩、苏门达腊猩猩、小鼠及大鼠之间具有相似的基因序列；生物信息学软件均有预测到该可变剪接3’位点存在。同时，为检测该可变剪接3’位点新型可变剪接产物，本研究对患者和正常人cDNA样本进行巢式PCR扩增和PCR-限制性片段长度多态性分析。结果显示：患者和正常人cDNA样本均存在该新型可变剪接产物。 第三部分建立了1型神经纤维瘤病的分子诊断方法，并分析其形成全身嵌合的1型神经纤维瘤病的原因。1型神经纤维瘤病（neurofibromatosis type1，NF1）是最常见的常染色体显性遗传病。其致病基因为 NF1基因(NF1，NG_009018.1），定位于染色体17q11.2，由57个组成性外显子和3个可变剪接外显子组成。本研究通过提取一例散发1型神经纤维瘤病病例的外周血RNA，PCR扩增NF1基因编码区序列并进行序列测定；找到突变后，基因组DNA途径证实突变。结果显示：先证者检测出无义突变c.7911C＞T(p.Q2510X)。为了对先证者的NF1基因进行嵌合突变分析，本研究针对已发现的突变，取先证者全血淋巴细胞、口腔上皮细胞和尿路上皮细胞基因组DNA进行PCR扩增，其产物进行T克隆及测序。结果表明：该突变在外周血淋巴细胞、口腔上皮细胞和尿路上皮细胞呈嵌合状态，含该突变的克隆数分别占总数的42％、36%、12%。 本研究不仅在国内较早建立了白质消融性白质脑病和1型神经纤维瘤病的分子诊断方法，而且发现了人EIF2B4基因的一个新型可变剪接产物，探讨了新生突变所致嵌合体的分析方法，对包含相似机制的遗传病的分子诊断有较大的借鉴意义。