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目的为了深入了解C57BL/6小鼠内耳形态发育的一般规律及内耳发育过程中相关蛋白的表达情况。方法本实验以C57BL/6小鼠为实验对象。对E8-Da的C57BL/6小鼠的内耳发育时间段的内耳标本进行冰冻切片处理。运用HE常规染色、三维重建技术、扫描电镜和基因蛋白表达免疫组织化学分析技术进行研究分析。结果①HE常规染色大体观上了解了C57BL/6小鼠内耳形态发育E8-Da期间的一般规律并且获得了E13的三维立体图像;②获得了各种听功能密切相关的结构的成熟时间点,基底膜(D10)、鼓阶前庭阶(D4)、螺旋器隧道(D12)、内螺旋沟(D10)、盖膜(D10)、毛细胞(D12)、螺旋神经元(D12)和蜗轴纤维(D12-D14);③完成了前神经决定蛋白、神经分化蛋白、神经营养因子和神经元特异性蛋白等内耳发育相关的蛋白的表达时限表并详细观察了其在内耳各个部位表达随发育变化的特点:④Calbindin在E16以后的螺旋神经元没有表达,但是在scarpa神经元持续表达。而NCS1在两者中都有表达;⑤Calbindin在E19-D22期间的毛细胞表达,但是在成年没有表达,并且内毛细胞出现表达较外毛细胞早,而表达消失较外毛细胞晚。MyosinⅦa在D1-D7的毛细胞清晰表达,但是D12表达渐弱,尤其是外毛细胞。⑥在C57BL/6鼠内耳发育过程中血管纹处有GAP-43,Peripherin,Neurofilament,BDNF,NT3和TUJ-1的表达;⑦神经元干细胞的标记物Isletl的表达从E16螺旋神经元所在的位置有大量的细胞核表达开始,一直到D7表达开始减弱,到D12表达的方式变为颗粒样表达。结论①听功能相关的重要结构的成熟时间,提示C57BL/6小鼠的耳蜗要发挥听觉功能应该在D12和D14之间。②内耳发育过程中位于螺旋器隧道下的管腔结构不是螺旋血管,该结构的作用未明,可能是一个与螺旋器发育密切相关的发育期结构。③螺旋神经元与scarpa神经元在钙离子相关的生命活动中存在差异。④Calbindin在毛细胞表达有时限性,可作为新生毛细胞的特异性标志物。⑤TUJ-1对内外毛细胞的传入和传出神经纤维染色,并推测外毛细胞中传入纤维发育比传出神经纤维迟。Peripherin对传入神经纤维染色而neurofilament可能对传出神经纤维染色。⑥血管纹中存在神经来源的细胞组织,可能是黑素细胞(暗细胞)。⑦在C57BL/6小鼠的内耳中,D7前的螺旋神经元仍然具有神经元干细胞的特性。⑧TUJ-1在鸟类和C57BL/6鼠内外毛细胞中表达的差异,可能暗示着自然状态下可再生与不可再生毛细胞可以用TUJ-1染色来区分,但需进一步验证。