论文部分内容阅读
小麦在生长发育过程中,常常受到病害、干旱、高温、高盐等生物逆境和非生物逆境的影响,严重影响了小麦的品质和产量。AtNPR1、PPTPSI.OoHSP18I、ScPRX1四种基因均是与植物抗性相关的基因。本研究通过基因枪及农杆菌介导法将该四种基因分别转化到小麦中,以期获得抗性提高的转基因植株,这将对小麦抗性品种选育具有重要意义。AtNPR1基因是与植物抗病相关的基因,它是SAR途径中的信号传导、调控元件,对于植物SAR的发生起着重要的调控作用。通过基因枪和农杆菌介导两种方法,以宁麦13幼胚为受体材料,将AtNPR1基因导入小麦中。共获得TO代再生植株59株,经PCR检测,共有阳性转基因植株8株,整体转化率为0.50%。对7株转基因阳性植株的自交T1代进行苗期抗赤霉病菌的表型鉴定和田间单花滴注接种鉴定,结果表明：转基因阳性植株的T1代较受体具有不同程度的抗性提高。在逆境刺激下,植物体内游离脯氨酸(Pro)的含量会显著增加,抗逆性强的品种体内积累的脯氨酸多,而超氧化物歧化酶(SOD)是需氧生物体内普遍存在的一种含金属酶,可防御超氧阴离子自由基对细胞的伤害,同样也可以反映植物的抗逆性。因此,Pro和SOD可作为植物抗逆性的生理指标。对转AtNPR1基因T1代部分植株进行生理检测,结果显示：逆境刺激后转基因植株体内Pro含量和SOD活性均高于对照组,表明逆境条件下AtNPR1基因得到一定程度的表达。PPTPSI基因是来自小立碗藓编码海藻糖合成酶的基因,可提高植株的抗旱、耐寒性,OoHSP18I基因是从酒酒球菌中克隆的编码热休克蛋白(HSP18)的基因,可提高植物的耐热性,ScPRX1基因可编码过氧还蛋白,提高植物的抗逆性。本研究通过农杆菌介导法将PPTPS1、OoHSP18I、ScPRX1三种基因分别转化到扬麦14成熟胚中,共获得TO代转基因再生植株34株,经PCR检测,共有阳性转基因植株27株,可见,在再生植株中阳性转基因植株的比例较高,整体转化率为0.63%。