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当前多氯联苯(Polychlorinated biphenyls,PCBs)仍是全球土壤中的典型污染物,微生物修复的低效性限制了其实际应用,降解菌在逆境下进入“活的但非可培养”(Viable but non-culturable,VBNC)的休眠状态是修复效率低下的重要原因,但目前相关研究极少。本论文通过抗生素诺氟沙星诱导PCBs高效降解菌——嗜联苯红球菌(Rhodococcus biphenylivorans)模式菌株TG9进入VBNC状态,研究了藤黄球菌(Micrococcus lutues)来源的复苏促进因子(Resuscitation-promoting factor,Rpf)蛋白对TG9的休眠复苏、生长刺激及PCBs降解强化作用机理,并进行了污染土壤模拟修复验证。主要研究结果与结论如下:(1)在培养基纯菌体系中,外源Rpf添加促进了VBNC状态TG9复苏并刺激复苏后细胞增殖。在复苏过程中,外源Rpf添加组中TG9的4个复苏促进因子编码基因的表达量显著高于未添加Rpf组(P<0.05),外源Rpf诱导TG9内源rpf基因表达是Rpf促进细胞复苏与生长的重要机制。(2)在纯菌降解实验中,复苏后TG9对联苯(Biphenyl,BP)的降解能力显著高于对数期和休眠期细胞(P<0.05)。Rpf添加促进了TG9对PCBs的降解。在以50 mg/L PCB12为唯一碳源和能源条件下,Rpf添加促进了VBNC状态TG9的复苏和增殖,72 h时PCB12降解率达到20.2%,显著高于灭活Rpf对照组及溶剂对照组(P<0.05);Rpf添加也促进了对数期TG9的生长,72 h时PCB12降解率达到87.6%,显著高于灭活Rpf对照组及溶剂对照组(P<0.05)。Rpf添加并未诱导PCBs降解关键基因bph A、bph C的表达,Rpf通过刺激TG9复苏生长提高细胞量是其促进PCBs降解的关键机制。(3)在土壤污染模拟修复中,Rpf添加促进了土壤中PCBs的去除。土壤初始PCBs浓度38.6 mg/kg下,Rpf添加49 d后,接种对数期TG9组、接种VBNC状态TG9组的PCBs消减率分别为35.8%、34.2%,显著高于各自的溶剂对照组及灭活Rpf对照组(P<0.05)。Rpf添加提高了土壤中细菌整体的可培养性,影响了菌群结构,提高了对PCBs降解具有重要作用的红球菌属的相对丰度,促进了TG9类似红球菌的数量增长并提升了其活跃度,单位质量土壤中PCBs降解关键基因bph A、bph C和rpf基因表达量提高。表明Rpf刺激了对其响应的PCBs降解菌的复苏和生长,从而促进了土壤中PCBs污染的修复。以上研究结果进一步明确了复苏促进因子对红球菌休眠复苏、生长刺激及有机污染物降解强化的机理,有助于开发降解菌休眠复苏刺激的新型环境有机污染修复技术及制剂,提升微生物修复实际应用效率。