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背景:支气管哮喘(bronchial asthma)是最常见的慢性呼吸道疾病之一,其本质是气道慢性炎症,给个人、家庭、社会卫生保障体系带来严重的负担。我国的发病率达1%-5%,且还在不断上升,尤其近20年来,哮喘的发病率和病死率呈现了明显增加的趋势。支气管哮喘发病机制复杂,Th2/Treg应答失衡在哮喘发病中起非常重要作用,通过检测Th2/Treg细胞亚群变化水平,可证实是否存在气道炎症及其严重程度,以及评估药物治疗效果,这有可能为今后支气管哮喘的研究和治疗提供新思路和新策略。哮喘在中医学称为“哮病,祖国医学对哮喘研究由来已久,早就有对哮喘相关症状、病因病机、治法等描述。中医认为哮喘有宿根,即宿痰内伏于肺,遇外感、情志等诱发为哮喘,自古至今临床研究发现中药复方在治疗支气管哮喘方面具有可靠疗效及独到优势。安喘方来源于名老中医多年临证实践和经验,对其治疗发作期寒哮证支气管哮喘已经作了初步研究,并形成院内制剂,于2015年获得国家专利。目的:在前期研究的基础上,本文从临床疗效与动物实验两方面佐证安喘方对发作期寒哮证发作期支气管哮喘治疗作用,并进一步探讨其治疗的物质基础和可能的分子机制,为安喘方应用于哮喘的临床治疗提供科学理论依据。方法:1.安喘方治疗支气管哮喘的成分分析研究:采用高效液相色谱法(HPLC)进行主要化学成分的含量分析,揭示其含有的成分含量;2.Th2/Treg细胞亚群的影响研究:制备哮喘小鼠模型,分为5组:正常组:全价SPF级饲料喂养,不干预;支气管哮喘模型组:予模型动物生理盐水灌胃;安喘方颗粒低剂量组:予模型动物低剂量(12.5g/kg)灌胃;安喘方颗粒高剂量组:予模型动物高剂量(50.1g/kg)灌胃;阳性对照泼尼松组:予模型动物泼尼松7.5mg/kg灌胃。提取及定量肺组织核蛋白,ELISA法分别检测小鼠血清中IL-4、IL-13、IL-10、TGF-β蛋白的变化水平,流式细胞仪检测Th2、Treg细胞亚群;3.临床研究:发作期寒哮证支气管哮喘患者100例,按照随机数字分为两组。治疗组服用安喘方每日1剂,同时联合西药布地奈德/福莫特罗粉吸入剂160/4.5ug,1吸2次/日;对照组只予布地奈德/福莫特罗粉吸入剂160/4.5ug治疗。4周后观察两组哮喘控制测试(ACT)评分、胸闷、喘息、肺部哮鸣音、咳嗽、咳痰、肺功能等变化并进行比较。结果:1.HPLC测定安喘方中盐酸麻黄碱在40.9μg/ml-409.0μg/ml之间,盐酸伪麻黄碱在20.6μg/ml-206.0μg/ml之间呈良好的线性关系,并精确绘出盐酸麻黄碱和盐酸伪麻黄碱HPLC图谱。2.安喘方干预后,给药组模型动物肺组织病理切片显示肺组织病变明显轻,气管壁损伤轻;与正常对照组Th2细胞相比较,给药组血液中Th2细胞比例明显较低(P<0.01),并呈剂量相关性(P<0.01);给药组小鼠血液中Treg细胞比例明显增加(P<0.01),且呈剂量相关性(P<0.01);给药组小鼠血清中与哮喘发病相关的炎症因子IL-4,IL-13均出现显著下降(P<0.01),呈剂量依赖效应(P<0.01),具有显著性差异;给药组抑炎因子IL-10大幅度升高(P<0.01),呈剂量依赖效应(P<0.01);TGF-β在模型组及安喘方给药组之间没有统计学差异(P>0.05)。3.临床研究:哮喘控制率比较:经4周治疗后,两组轻度哮喘患者的完全控制率均优于同组中度哮喘患者(P<0.05),中度哮喘的患者,治疗组的完全控制率优于对照组(P<0.05);中医证侯疗效比较:两组轻度发作显控率均高于同组中度发作(P<0.05),2周后治疗组中度发作显控率高于对照组(P<0.05),4周后疗效差异更明显(P<0.01);单项症状比较:两组轻度发作胸闷症状显控率均高于同组中度发作的患者(P<0.05);治疗2周和4周后,中度发作肺部哮鸣音的显控率治疗组明显高于对照组(P<0.05),轻度发作显控率治疗组也优于对照组(P<0.05);治疗2周后,两组轻度发作喘息症状显控率均高于同组中度发作(P<0.05),4周后疗效差异更明显(P<0.01),4周后轻度发作喘息症状显控率治疗组明显高于对照组(P<0.05);两组轻度发作肺部哮鸣音显控率均高于同组中度发作(P<0.05),2周后中度发作肺部哮鸣音显控率治疗组显著高于对照组(P<0.01),4周后治疗组轻度发作显控率也明显优于对照组(P<0.01);咳嗽、咳痰症状比较:不管治疗2周还是治疗治疗4周,两组轻度发作咳嗽、咳痰症状的显控率与同组中度发作比较均没有显著差异(P>0.05);而中度发作比较也没有显著差异(P>0.05);肺功能比较:两组轻度发作肺功能改善率均显著高于同组中度发作(P<0.01),治疗组轻度、中度发作改善率较对照组无明显差异(P>0.05);不良反应:治疗组震颤1例;对照组震颤2例,咽部刺激1例,共3例;两组不良反应率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:1.安喘方治疗支气管哮喘的化学成分主要是盐酸麻黄碱和盐酸伪麻黄碱。2.安喘方通过减少Th2细胞亚群的分化水平,增加Treg细胞的相对含量,恢复哮喘状态导致的Th2/Treg细胞亚群失衡,从而抑制与哮喘发病相关的炎症因子如IL-4,IL-13,促进抑炎因子IL-10的分泌,降低气道炎症、缓解气道高反应。3.安喘方联合西药布地奈德/福莫特罗较单用西药在治疗发作期支气管哮喘具有明显优势,证实了安喘方的疗效,它是治疗其发作期寒哮证支气管哮喘轻、中度的有效组方。