背景:胰腺癌是最常见的消化道恶性肿瘤,因为其恶性程度很高,素有癌王之称,早期症状不明显,临床疗效不理想。深入探讨胰腺癌发病的分子机制成为当前研究热点。泛素特异性肽酶49（Ubiquitin-specific peptidase 49,USP49）,是去泛素化酶家族的成员之一,通过去泛素化作用,抑制蛋白的泛素化降解而增强蛋白在细胞中的稳定性。目前,研究显示USP49能够调控细胞增殖、分化等关键细胞程序,与肿瘤的发生发展有关。本文首先通过组织标本、细胞学实验及动物实验探讨USP49在胰腺癌中的作用。此外,本实验室前期还发现一个胰腺癌的促癌因子FBXO45,分析FBXO45与USP49在胰腺癌组织中的表达,发现两者存在负相关。因此,为了进一步探讨USP49调控胰腺癌细胞生长、转移的分子机制,我们还将探讨FBXO45对USP49的调控作用,以及USP49是否介导FBXO45在胰腺癌中的促癌作用。希望通过本研究能为探讨胰腺癌发病的分子机制提供更多理论和实验依据。目的:研究USP49抑制胰腺癌细胞生长、转移的机制研究。方法:通过免疫组化染色检测人胰腺癌组织中USP49表达情况,分析USP49与患者预后的关系。利用TCGA和GTEx数据库信息,分析USP49在胰腺癌组织中m RNA表达情况。选取胰腺癌Panc-1和Patu-8988细胞,利用脂质体转染法将USP49 si RNAs序列和USP49 c DNA序列导入胰腺癌细胞内,48h后分别提取蛋白和RNA,通过蛋白免疫印迹实验和实时荧光定量PCR实验验证USP49在细胞内敲除和过表达情况,随后通过MTT、TUNEL、Transwell、细胞划痕等实验检测USP49对胰腺癌细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移的影响。构建USP49稳定过表达胰腺癌细胞株,经裸鼠皮下注射,构建异种移植瘤模型,定期观察小鼠体内成瘤情况,分析USP49对小鼠肿瘤生长的影响。通过下调FBXO45,Western-blot检测USP49蛋白水平变化。利用rescue实验,通过共同转染FBXO45si RNA和USP49si RNA观察胰腺癌细胞增殖,凋亡,迁移侵袭的变化,探讨USP49与FBXO45是否存在调控关系进而影响胰腺癌恶性进展。结果:1.免疫组化结果显示USP49在胰腺癌组织中表达低于癌旁正常组织,USP49低表达与肿瘤的分级有相关性（p?=?0.0371）;生存曲线显示USP49高表达患者生存期长于低表达患者（p=0.0027）。2.TCGA和GTEx数据库分析结果显示USP49在胰腺癌组织中m RNA水平低于正常对照组。3.转染USP49 c DNA序列后,胰腺癌细胞内USP49表达明显高于对照组,转染USP49si RNA序列后,胰腺癌细胞内USP49明显低于对照。4.胰腺癌细胞过表达USP49后,明显抑制细胞增殖,促进细胞凋亡;胰腺癌细胞敲除USP49后,明显促进细胞增殖,抑制细胞凋亡。5.胰腺癌细胞内USP49升高后,细胞迁移、侵袭能力明显降低;胰腺癌细胞内USP49表达降低后,细胞迁移、侵袭能力明显增强。6.动物实验结果证明,USP49过表达后,抑制体内肿瘤生长。7.下调FBXO45,胰腺癌中USP49蛋白水平增加8.USP49下调促进胰腺癌细胞增殖,迁移侵袭及抑制凋亡的程度可以被FBXO45的下调部分逆转。结论:USP49表达是胰腺癌独立的预后因子;USP49抑制胰腺癌细胞的生长、转移,抑制小鼠肿瘤生长;FBXO45下调胰腺癌细胞内USP49表达;FBXO45通过下调USP49表达而促进胰腺癌细胞生长、转移。