葡萄糖氧化酶电极的电化学石英晶体阻抗分析法研究

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生物传感器是分析化学学科的重要研究领域之一。酶电极在临床诊断(特别是糖尿病)和基础医学研究等领域中有着广泛的应用前景。石英晶体微天平(QCM)可现场动态监测电极表面低至纳克级(单分子层或亚单分子层)的质量变化,以及电极表面修饰膜粘弹性和溶液粘密度的微小变化,在电化学和免标记生物传感领域应用广泛。压电石英晶体阻抗分析(PQCI)法可实时获取石英晶振的电声阻抗谱,从而得到谐振频率和等效电路参数等多维信息,可认为是一种强有力的多参数QCM。然而,QCM用于酶电极的研究鲜见报道,包括酶电极制作过程中各修饰步骤的动态监测,尤其是固定酶的定量评估。有鉴于此,在广泛的文献工作基础上,本论文中开展了以下创新研究工作: 1.综述了酶安培传感器和QCM的近期工作进展。 2.采用滴干法将葡萄糖氧化酶(GOD)固定在普鲁士蓝(PB)修饰的金电极上,并用戊二醛(GA)交联GOD和聚邻苯胺(PoPD)外层膜,从而制备出葡萄糖安培传感器。该传感器基于PoPD/GOD-GA/PB/Au电极上的电活性PB层催化酶反应产物H2O2的还原进行检测。采用多参数QCM监测电极的各步修饰过程,基于固定化GOD的质量(QCM测得)和酶反应产物过氧化氢的量(安培检测),首次评估了固定化酶的有效比活性(ESA,定义为单位质量酶的酶活性,U g-1)。在同样的实验条件下,也通过检测酶反应产物H2O2在PB/Au电极上产生的还原电流对溶液中游离GOD的ESA进行评估。研究了各种实验参数,包括工作电位、溶液pH和电活性干扰物,对葡萄糖传感的影响。在最佳电位-0.05V vs SCE下和pH 7.0磷酸缓冲溶液中,该葡萄糖生物传感器的电流响应的线性范围为0.05到10mmol L-1,最低检测限为8μmol L-1。该传感器响应时间短(~5s之内),抗干扰能力强,稳定性好(4℃下pH 7.0的磷酸缓冲液中保存30天后,
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