苏铁蕨贯众的化学成分及质量研究

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本论文分为三个部分第一部分文献综述本部分在系统查阅2010年以前国内外相关文献的基础上,对苏铁蕨贯众和乌毛蕨科苏铁蕨属、乌毛蕨属、狗脊属植物的产地、化学成分和药理活性研究进展进行了总结,形成综述。第二部分苏铁蕨贯众的实验研究1.苏铁蕨贯众的化学成分研究经过反复硅胶柱层析,利用波谱技术(UV、1H-NMR、13C-NMR、2D-NMR)和色谱手段(TLC),并参考相关文献,最终从苏铁蕨(Brainea insignis (Hook.) J.Sm)的根茎中分离鉴定出8个化合物,分别为原儿茶酸、4-(3,4-二羟苯基)-3-丁烯-2-酮、对羟基苯甲酸、荚果蕨素-7-O-葡萄糖苷、穗花杉双黄酮、5-O-咖啡酰基-莽草酸、坡那甾酮-A和坡那甾苷-A,其中前5个为首次从该植物中分离得到。另有2个化合物结构尚未确定,其中一个根据氢谱信息初步判断为甾醇类化合物。2.苏铁蕨贯众中原儿茶酸和对羟基苯甲酸的含量测定方法研究建立了苏铁蕨贯众中原儿茶酸和对羟基苯甲酸的HPLC含量测定方法,在方法学考察的基础上,对不同产地的苏铁蕨贯众进行了这两种成分的含量测定,结果表明:原儿茶酸在进样量0.0202μg~0.1414μg范围内与峰面积呈良好的线性关系,回归方程为:Y=4143.2X-3.275(r=0.9999),对羟基苯甲酸在进样量0.006μg~0.042μg范围内与峰面积呈良好的线性关系,回归方程为Y=5353.2X-0.6667(r=0.9999)。精密度、稳定性、重复性和加样回收率均符合要求。此外,通过比较可以发现6个不同产地的8批苏铁蕨贯众中这两种成分的含量也存在一定差异,其中海南海口产的苏铁蕨贯众原儿茶酸含量最高(0.1314mg/g),江苏南京的含量最低(0.0752 mg/g);对羟基苯甲酸含量亦是海南海口产苏铁蕨贯众最高(0.0535 mg/g),广东广州的最低(0.0177 mg/g)。3.不同产地苏铁蕨贯众中坡那甾酮-A和坡那甾苷-A的含量测定研究采用本实验室前期建立的HPLC法同时测定不同产地苏铁蕨贯众中坡那甾酮-A和坡那甾苷-A的含量,结果表明:通过比较可以发现6个不同产地的8批苏铁蕨贯众中这两种成分的含量存在一定差异,其中广东广州产的苏铁蕨贯众坡那甾苷-A含量最高(4.4729mg/g),福建龙海的含量最低(2.4826mg/g);江苏南京产的苏铁蕨贯众坡那甾酮-A含量最高(0.2642mg/g),云南昆明的含量最低(0.1057 mg/g),其他产地苏铁蕨贯众坡那甾苷-A和坡那甾酮-A的含量均在此范围内。4.苏铁蕨贯众中总黄酮的含量测定方法研究采用盐酸-镁粉比色法建立了苏铁蕨贯众总黄酮的含量测定方法。在方法学考察的基础上,对不同产地苏铁蕨贯众的总黄酮进行了含量测定。结果表明:对照品芦丁在浓度0.0115mg/ml-0.1261mg/ml范围内与吸光度呈良好的线性关系,回归方程为Y=6.5952X-0.0299(r=0.9997),精密度、重复性、稳定性及加样回收率实验结果均符合要求。此外,通过比较可以发现6个不同产地的8批苏铁蕨贯众中总黄酮的含量基本一致(RSD=4.19%),其中云南昆明产的苏铁蕨贯众总黄酮含量最高(12.24%),江苏南京产的含量最低(10.91%),其他产地的苏铁蕨贯众总黄酮含量均在此范围内。第三部分总结与讨论本论文通过对苏铁蕨贯众的化学成分和质量研究得出以下结论:第一,苏铁蕨贯众所含的化学成分类别非常复杂,包括甾类、黄酮类(黄酮、二氢黄酮和双黄酮)、苯丙素类和小分子有机酸类。从含量上看,甾类、黄酮和小分子有机酸为主要成分,其中坡那甾苷-A的含量最高达到4.4729mg/g(广东广州),原儿茶酸的含量最高达到0.1314mg/g(海南海口);单一的黄酮化合物含量虽然不高,但其种类繁多,其总黄酮含量在10.91%-12.34%范围内。第二,从药理活性方面来看,苏铁蕨贯众中的主要成分原儿茶酸和对羟基苯甲酸都具有抗菌活性,坡那甾酮-A和坡那甾苷-A具有驱虫作用,黄酮类化合物具有抗氧化、抗菌和抗肿瘤的作用,这些药理活性均与药典收载的绵马贯众相一致,为苏铁蕨在临床作贯众使用提供了理论依据,也为进一步开发利用苏铁蕨贯众奠定了基础。
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