小型猪内耳发育形态学观察

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随着生命科学的发展,猪在生命科学研究领域中越来越具有重要的实验应用价值。猪在人类疾病动物模型、新药安全性有效性评价、异种器官移植供体等领域均显示出独特优势。比较医学研究表明,猪在心血管消化系统、皮肤结构、骨骼发育、营养需要、矿物质代谢等方面,与人类有较大的相似性。用猪作动物模型在许多研究领域优于其它实验动物。因此在医学生物学研究中,猪是日益广泛应用的实验动物。利用小型猪进行医学科学研究已十分广泛,几乎涉及生命科学的各个学科。实验用小型猪在我国具有丰富而又独特的资源,它们在原产地均为长期近亲交配形成的封闭群体,如贵州、西双版纳、巴马、五指山及西藏等地区均有选育各具特色的小型猪品系。由于普通猪体型大,饲育费用高,不便于实验操作和术后管理,而小型猪由于其体型较小,具有易于实验操作、易于微生物控制、饲养成本低等优点,逐渐成为生命科学研究中的重要实验动物。随着动物保护及“3R"原则的普及等因素,小型猪的应用数量逐年大幅度递增,小型猪有望取代实验猴、犬成为被大量使用的新型实验动物。由此可见,小型猪作为动物模型在生物医学研究中具有广阔的应用前景和重要地位,小型猪作为实验动物有着无可比拟的优越性。为了更好的研究小型猪作为耳科研究的动物模型,研究小型猪的内耳发育的形态学变化,为以后的研究提供形态学支持。第一部分小型猪耳蜗发育的形态学观察目的:研究国内贵州小型香猪的内耳发育演变过程,为小型猪耳蜗的发育过程中的基因调控、免疫组化等提供形态学支持,为小型猪作为耳科研究的动物模型提供形态学支持。材料与方法:选用怀孕E21(embryo21)、E28、E32、 E35、 E42、 E49、 E56、 E63、 E70、 E77、 E84、 E91、 E98、 E107的贵州香猪,≤49天取胚胎头,≥56天在显微镜下取耳蜗,利用耳蜗火棉胶包埋冰冻切片技术,胚胎头水平切片,耳蜗平行于蜗轴切片,进行连续切片,HE染色方法观察贵州小型香猪耳蜗发育形态演变过程。结果:贵州小型香猪听泡在胚胎21天出现,随后耳蜗开始发育,在胚胎49天到胚胎56天的形态学发育变化较大,到胚胎56天耳蜗已初具成熟外观,在胚胎发育过程中,贵州小型猪的耳蜗在胚胎56天、63天可以观察到其内填充的间充质,在胚胎70天可以观察到三排外毛细胞及一排内毛细胞,蜗管发育到3.5圈。到胚胎91天形成形态成熟的毛细胞及支持细胞,螺旋器的结构达到成熟的外观。结论:内耳听觉器官发育具有一定的规律,贵州小型香猪的耳蜗发育时间较长,在胚胎时期耳蜗已达成熟的外观,作为大型的哺乳动物与人类的内耳发育过程更具相似性。第二部分小型猪耳蜗血管纹发育的形态学观察目的:血管纹(stria vascularis)位于蜗管外侧壁,为代谢活跃的上皮组织,具有分泌K+和吸收内淋巴液电解质的功能,并产生内淋巴正电位。内淋巴中高浓度的K+聚积及内、外淋巴液中K+循环是维持耳蜗功能和内环境稳定的基础。通过观察贵州小型香猪血管纹的发育过程,为研究血管纹发育过程中的基因调控、免疫组化及原位杂交等提供形态学支持。材料与方法:选用E63、 E77、 E84、 E98的耳蜗,行透射电镜观察血管纹结构。结果:胚胎49天血管纹开始发育,在胚胎56天观察到血管纹上皮,在胚胎91天血管纹的结构发育成熟,观察到三层典型的细胞即边缘细胞、中间细胞及基底细胞。结论:贵州小型香猪的血管纹的发育遵循了从底圈向顶圈的发育顺序,在胚胎时期血管纹发育成熟,与人类具有相似性。
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