禽蛋生产是当今畜牧业高效产业之一,与人们的生活息息相关。家禽为卵生动物,性成熟时没有发情周期、发情行为、妊娠期和哺乳期,适宜条件下其卵泡可连续发育、排卵和受精,排卵后不形成黄体。这些特点使家禽常作为良好的试验模型,在卵泡发育生物学的研究中广泛应用。本试验以不同产蛋期蛋鸡为研究对象,以免疫组织化学法和荧光定量PCR技术研究NGF及其受体在不同产蛋期卵巢、等级前卵泡、优势卵泡和输卵管上的表达定位及其mRNA表达水平。1.NGF及其受体在不同产蛋期蛋鸡等级卵泡上的表达研究为了研究NGF及其受体在不同产蛋期蛋鸡卵巢和等级卵泡上的表达情况,本试验以83、230、330、450和550日龄五个时期的蛋鸡作为试验动物,通过免疫组织化学方法和荧光定量PCR技术研究NGF及其受体在不同产蛋期卵巢和等级卵泡上的表达定位及其mRNA表达水平。免疫组织化学结果表明：NGF及其受体在83日龄性未成熟蛋鸡卵巢上没有表达；除了450日龄产蛋后期等级前卵泡的颗粒细胞,NGF和p75在各产蛋期等级前卵泡的膜细胞和颗粒细胞上均有表达；TrkA在各产蛋期的等级前卵泡膜细胞、230日龄产蛋高峰期等级前卵泡颗粒细胞、450日龄产蛋后期SWF和550日龄产蛋末期SWF和SYF的颗粒细胞上表达。荧光定量PCR结果显示：NGF及其受体：nRNA在各时期卵巢和各级卵泡上均有表达,其中230日龄产蛋高峰期SYF上NGF及其受体TrkA和p75的基因表达量都显著高于130日龄产蛋前期、450日龄产蛋后期和550日龄产蛋末期,同时230日龄产蛋高峰期优势卵泡中NGF及其受体TrkA和p75mRNA表达水平整体高于其他三个产蛋期。此外相关性分析发现,血清中雌激素和孕激素水平与NGF和TrkA在SYF上的表达强度成正相关。综上所述,NGF及其受体在产蛋期蛋鸡等级前卵泡和优势卵泡上都存在不同程度的表达,产蛋高峰期的表达量显著高于其他各时期,而且NGF和TrkA在各产蛋期SYF上的表达量变化规律与血清中雌激素和孕激素水平变化规律成正相关,推测NGF及其受体可能协同雌激素和孕激素在蛋鸡等级卵泡的生长,发育和排卵过程中起重要作用。2.NGF及其受体在不同产蛋期蛋鸡输卵管上的表达研究为了研究NGF及其受体在不同产蛋期蛋鸡输卵管上的表达情况,本试验以83、230、330、450和550日龄五个时期的蛋鸡作为试验动物,通过免疫组织化学方法和荧光定量PCR技术研究NGF及其受体在不同产蛋期蛋鸡输卵管上的表达定位及其mRNA表达水平。结果表明：NGF及其受体在83日龄的蛋鸡输卵管上未发现有阳性表达；而在230、330、450和550日龄蛋鸡输卵管漏斗部,膨大部和峡部的黏膜上皮细胞上均有不同程度的表达,表达强度随着日龄的增加而呈现“由弱到强再变弱”的变化趋势；NGF及其受体mRNA在各产蛋期输卵管漏斗部,膨大部和峡部上均有表达,其中230日龄产蛋高峰期峡部NGF和p75基因表达量显著高于130日龄产蛋前期和450日龄产蛋后期峡部,但同时期膨大部和峡部TrkA表达量却显著低于130日龄产蛋初期和450日龄产蛋后期膨大部和峡部。上述结果表明,NGF在不同产蛋期蛋鸡输卵管上都有表达,且产蛋高峰期的表达量显著高于其他各时期,说明NGF的表达量与蛋鸡的生殖状况和产蛋性能相关,推测NGF可能参与调控蛋鸡输卵管的生长发育和产蛋过程。总之,禽类卵泡发育和产蛋过程是一个复杂的生理过程,多个因素在该过程中起作用。本研究结果表明,NGF可能协同雌激素和孕激素参与调节等级前卵泡、优势卵泡和输卵管的生长发育。然而,NGF在其中的具体调节机制还需要进一步研究。