【摘 要】
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天然生物神经毒素的研究对神经生物学、药理学、药物学的研究与发展具有非常重要的意义,目前研究人员利用蜘蛛毒素已经开发出临床新药,在缓解疼痛和治疗心律失常方面都有很好
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天然生物神经毒素的研究对神经生物学、药理学、药物学的研究与发展具有非常重要的意义,目前研究人员利用蜘蛛毒素已经开发出临床新药,在缓解疼痛和治疗心律失常方面都有很好的效果。雷氏大疣蛛(Macrothele raveni)是我国最近发现的一个蜘蛛新种,本文探讨了雷氏大疣蛛毒素(Macrothele raveni Toxin, MrT)对人肺癌A549细胞增殖的抑制作用,具有抗肿瘤活性的蛋白组分的分离纯化,为研制开发新型抗肿瘤药物奠定基础。本实验以人肺癌细胞株A549作为腺源性细胞株代表,用雷氏大疣蛛毒素对其进行体外药敏实验,噻唑蓝MTT法检测结果表明,浓度在2.5-40μg/mL MrT对A549细胞株的增殖具有明显的抑制作用,最高药物敏感浓度为20μg/mL,并且随着雷氏大疣蛛毒素浓度的增加和作用时间的延长,该毒素对A549细胞株增殖的抑制作用逐渐增强,IC50为16gg/mL。采用反相层析法分离纯化了雷氏大疣蛛毒素,共分离出13个组分,通过MTT法检测,其中组分12(MrT-12)能抑制A549细胞株的增殖,效果显著、稳定性好,且分离峰型单一。A549细胞株经MrT-12处理后,随着浓度的升高和时间的延长,抑制作用明显增强,IC50为4.5μg/mL。MrT-12经DEAE分离后测得具有最高抗癌活性的组分12-3经电泳分析,仍显示两条蛋白条带,其分子量大约在50kD和22kD左右。
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