Kiss-1/GPR54系统在山羊胰脏分泌及表达机制

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本试验旨在探究KiSS-1/GPR54系统对山羊消化系统可能存在的生物学作用,同时以选择该系统表达量最高的胰脏为切入点,揭示KiSS-1/GPR54系统在山羊胰脏分泌表达的分布定位和其可能存在的表达机制。试验利用基因克隆、反转录PCR、荧光定量PCR、免疫组化等技术,对山羊消化系统各组织KiSS-1基因和GPR54基因的转录水平的相对表达进行分析,并对KiSS-1/GPR54系统在成年山羊胰脏表达与定位探究以及KiSS-1/GPR54系统在不同时期山羊胰脏的KiSS-1/GPR54系统的表达情况。研究发现:(1)KiSS-1基因在山羊消化系统舌、瘤胃、网胃、瓣胃、皱胃、肝脏、胰脏、小肠均有表达,且在胰脏中的表达量最高,其次是瘤胃。GPR54基因在山羊消化系统舌、网胃、瓣胃、皱胃、肝脏、胰脏、小肠均有表达,瘤胃无表达,且胰脏表达最高,其次是肝脏。(2)KiSS-1基因和GPR54基因的mRNA在山羊胰脏中稳定表达,且免疫组化实验检测到在山羊胰岛细胞发现Kisspeptin(KiSS-1蛋白产物)和GPR54蛋白有阳性信号,而腺泡细胞和导管细胞未检测到阳性信号。(3)在初生山羊胰脏中未检测到KiSS-1/GPR54系统的mRNA转录,而在初情期山羊胰脏中检测到该系统的mRNA转录,提示KiSS-1/GPR54系统在山羊胰脏中的表达呈现基因时间性表达。上述试验结果表明,KiSS-1/GPR54系统在山羊初情期的消化系统中广泛表达,但该系统在初生时胰脏内并不表达,这种基因表达的时效性说明KiSS-1/GPR54系统通过协同作用,利用调节胰岛素的分泌来保障动物的发情。
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