论文部分内容阅读
目的：探讨三维平衡正脊手法治疗神经根型颈椎病的临床疗效，研究正脊手法操作过程中的生物力学作用规律，及椎体和椎间盘的应力、应变，分析手法对椎间盘髓核影响最大的生物力学因素，并对体外培养的髓核细胞加载相应的力学信号，从微观角度探究此力学因素对髓核细胞形态及功能的影响，为阐释三维平衡正脊手法治疗神经根型颈椎病的疗效机制提供支撑。
方法：①临床观察三维平衡正脊手法治疗神经根型颈椎病的视觉模拟量表(VAS)、颈椎病临床评价量表(CASCS)及总体疗效情况，分析手法与临床疗效的相关性，并选出1名疗效显著的患者，进行生物力学研究。②使用西门子SOMATOMSensation64排螺旋CT获取该患者的颈椎影像学DICOM图像数据，借助医学影像控制系统(MIMICS)+大型通用有限元分析软件(ANSYS)建立颈椎三维有限元模型。同时使用压感动捕手套Miiglove采集手法的力学信息，依据笛卡尔坐标系分解为单个的力学数据，并把它加载到颈椎三维有限元模型中，研究手法过程中椎体和椎间盘的应力、应变，分析出对髓核影响最大的力学因素。③收集手术后的人体椎间盘髓核组织标本，进行髓核细胞的原代培养、传代培养，并通过甲苯胺蓝染色、免疫组化实验鉴定。传代到第2代的髓核细胞铺硅胶板，根据②分析出的影响最大的生物力因素，给髓核细胞加载相应的力学信号。倒置相差显微镜观察细胞形态。通过细胞增殖实验，比较力学因素对髓核细胞增殖生物学功能影响。提取细胞总RNA并反转录，通过实时荧光定量PCR检测加力组和对照组COL1和COL2基因mRNA表达情况。
结果：1、临床研究：三维平衡正脊手法治疗组治疗结束时VAS评分改善情况优于对照组(P＜0.05)，说明三维平衡正脊手法可显著改善患者疼痛症状。随访时治疗组的VAS评分与对照组无差异(P＞0.05)。治疗结束时两组CASCS评分无明显区别(P＞0.05)，而随访时治疗组的CASCS评分变化优于对照组(P＜0.05)，既随访时治疗组在改善患者颈部体征及功能等方面优于对照组。治疗结束时治疗组的愈显率和总有效率分别为23.7%、94.7%，均高于对照组的15.4%、89.7%，但差异均无统计学意义(P＞0.05)，但随访时治疗组的CASCS评分明显高于对照组(P＜0.05)，表明治疗组在改善患者颈部体征及功能方面的远期疗效优于对照组。
2、生物力学作用机制研究：为了研究三维平衡正脊手法治疗神经根型颈椎病的疗效机制，我们建立了颈椎三维有限元模型，在模型上端加载头部重力50N，向上63N的牵引力，C3向右旋转45°，并给予C6棘突向左偏前方25°119N的旋转力。发现在三维平衡正脊手法操作过程中，相对于棘突上水平方向的推力，正脊手法向上的牵引力对椎间盘内髓核影响最大。提示我们三维平衡正脊手法操作过程中，牵张力对于神经根型颈椎病的治疗起着重要的作用。
3、微观生物学机制研究：加力组髓核细胞生长状态较好，形态近似圆形居多，突起多位于细胞长轴的两端，且细胞突起短而粗，细胞折光性较好。细胞增殖实验结果表明加力组髓核细胞增殖能力较强，生长速度较快。荧光定量PCR检测髓核细胞胶原蛋白的表达，加力组的髓核细胞表达Ⅰ型和Ⅱ型胶原蛋白显著高于对照组。
结论：1、三维平衡正脊手法不仅能改善神经根型颈椎病的疼痛症状，在改善患者颈部体征及功能方面远期疗效更优，且在治疗结束后患者颈椎的体征及功能仍有进一步恢复的可能。三维平衡正脊手法治疗神经根型颈椎病的作用机理是通过缓解颈部肌痉挛，改善颈椎骨间结构，恢复颈椎的内部和外部力学平衡，降低对神经根等的物理刺激和压迫，从而改善神经根刺激的相关症状。为三维平衡正脊手法治疗神经根型颈椎病的疗效提供临床依据，促进中医正脊手法的临床推广应用。
2、三维平衡正脊手法在棘突上的推力对髓核应力及应变影响不大，而手法中向上的牵引力对椎间盘内髓核影响最大，由此我们认为正脊手法对髓核影响最大的为牵引力，牵引力对髓核的影响是我们研究手法治疗神经根型颈椎病的重点，因此我们后面分子生物学部分重点研究牵张力对髓核生物学功能影响。为阐明三维平衡正脊手法治疗神经根型颈椎病的疗效机制提供生物力学作用机制支撑。
3、牵张力对椎间盘髓核细胞影响的形态及生物学功能发挥着重要的调控作用，体外培养的髓核细胞在牵张环境中生长状态较好，形态以类圆形为主，突起多位于细胞长轴的两端，且细胞突起短而粗，细胞折光性较好。生理性的牵张力促进髓核细胞生长、增殖等生物学功能，促进细胞分泌细胞外基质，可能具有改善椎间盘髓核组织退变的作用，为阐明三维平衡正脊手法治疗神经根型颈椎病的疗效机制提供微观生物学作用机制的支撑。
方法：①临床观察三维平衡正脊手法治疗神经根型颈椎病的视觉模拟量表(VAS)、颈椎病临床评价量表(CASCS)及总体疗效情况，分析手法与临床疗效的相关性，并选出1名疗效显著的患者，进行生物力学研究。②使用西门子SOMATOMSensation64排螺旋CT获取该患者的颈椎影像学DICOM图像数据，借助医学影像控制系统(MIMICS)+大型通用有限元分析软件(ANSYS)建立颈椎三维有限元模型。同时使用压感动捕手套Miiglove采集手法的力学信息，依据笛卡尔坐标系分解为单个的力学数据，并把它加载到颈椎三维有限元模型中，研究手法过程中椎体和椎间盘的应力、应变，分析出对髓核影响最大的力学因素。③收集手术后的人体椎间盘髓核组织标本，进行髓核细胞的原代培养、传代培养，并通过甲苯胺蓝染色、免疫组化实验鉴定。传代到第2代的髓核细胞铺硅胶板，根据②分析出的影响最大的生物力因素，给髓核细胞加载相应的力学信号。倒置相差显微镜观察细胞形态。通过细胞增殖实验，比较力学因素对髓核细胞增殖生物学功能影响。提取细胞总RNA并反转录，通过实时荧光定量PCR检测加力组和对照组COL1和COL2基因mRNA表达情况。
结果：1、临床研究：三维平衡正脊手法治疗组治疗结束时VAS评分改善情况优于对照组(P＜0.05)，说明三维平衡正脊手法可显著改善患者疼痛症状。随访时治疗组的VAS评分与对照组无差异(P＞0.05)。治疗结束时两组CASCS评分无明显区别(P＞0.05)，而随访时治疗组的CASCS评分变化优于对照组(P＜0.05)，既随访时治疗组在改善患者颈部体征及功能等方面优于对照组。治疗结束时治疗组的愈显率和总有效率分别为23.7%、94.7%，均高于对照组的15.4%、89.7%，但差异均无统计学意义(P＞0.05)，但随访时治疗组的CASCS评分明显高于对照组(P＜0.05)，表明治疗组在改善患者颈部体征及功能方面的远期疗效优于对照组。
2、生物力学作用机制研究：为了研究三维平衡正脊手法治疗神经根型颈椎病的疗效机制，我们建立了颈椎三维有限元模型，在模型上端加载头部重力50N，向上63N的牵引力，C3向右旋转45°，并给予C6棘突向左偏前方25°119N的旋转力。发现在三维平衡正脊手法操作过程中，相对于棘突上水平方向的推力，正脊手法向上的牵引力对椎间盘内髓核影响最大。提示我们三维平衡正脊手法操作过程中，牵张力对于神经根型颈椎病的治疗起着重要的作用。
3、微观生物学机制研究：加力组髓核细胞生长状态较好，形态近似圆形居多，突起多位于细胞长轴的两端，且细胞突起短而粗，细胞折光性较好。细胞增殖实验结果表明加力组髓核细胞增殖能力较强，生长速度较快。荧光定量PCR检测髓核细胞胶原蛋白的表达，加力组的髓核细胞表达Ⅰ型和Ⅱ型胶原蛋白显著高于对照组。
结论：1、三维平衡正脊手法不仅能改善神经根型颈椎病的疼痛症状，在改善患者颈部体征及功能方面远期疗效更优，且在治疗结束后患者颈椎的体征及功能仍有进一步恢复的可能。三维平衡正脊手法治疗神经根型颈椎病的作用机理是通过缓解颈部肌痉挛，改善颈椎骨间结构，恢复颈椎的内部和外部力学平衡，降低对神经根等的物理刺激和压迫，从而改善神经根刺激的相关症状。为三维平衡正脊手法治疗神经根型颈椎病的疗效提供临床依据，促进中医正脊手法的临床推广应用。
2、三维平衡正脊手法在棘突上的推力对髓核应力及应变影响不大，而手法中向上的牵引力对椎间盘内髓核影响最大，由此我们认为正脊手法对髓核影响最大的为牵引力，牵引力对髓核的影响是我们研究手法治疗神经根型颈椎病的重点，因此我们后面分子生物学部分重点研究牵张力对髓核生物学功能影响。为阐明三维平衡正脊手法治疗神经根型颈椎病的疗效机制提供生物力学作用机制支撑。
3、牵张力对椎间盘髓核细胞影响的形态及生物学功能发挥着重要的调控作用，体外培养的髓核细胞在牵张环境中生长状态较好，形态以类圆形为主，突起多位于细胞长轴的两端，且细胞突起短而粗，细胞折光性较好。生理性的牵张力促进髓核细胞生长、增殖等生物学功能，促进细胞分泌细胞外基质，可能具有改善椎间盘髓核组织退变的作用，为阐明三维平衡正脊手法治疗神经根型颈椎病的疗效机制提供微观生物学作用机制的支撑。