乳酸菌是一类能从可发酵性碳水化合物中生产乳酸的革兰氏阳性细菌的通称。这类微生物广泛存在于人、畜、禽肠道、许多食品、饲料及自然界中,并在很多与人类生活息息相关的产业领域得到广泛的应用,如工业、农业、医疗业等,得到了人们的广泛关注。目前国内外生物学家已证实,肠内乳酸菌与健康长寿有着非常密切的关系。大量研究也表明,作为活菌制剂添加入食品中益生菌能提升人体的健康水平,并能预防和治疗某些疾病。本课题的研究目标是通过体外实验和动物模型鉴定并研究从青贮饲料中分离的6株乳酸菌的益生菌特性。综合16S r DNA序列比对分析和系统发育分类学鉴定,L1被证实属于鼠李糖乳杆菌,其他5株乳酸菌证实属于肠球菌属。利用高效液相色谱法对这6株乳酸菌的代谢产物进行了分析检测；对目标菌株进行安全水平分析,包括检测致病基因是否存在和对抗生素的敏感性；分析目标菌株的存活性,通过对胃肠道环境的耐受实验；检测目标菌株对肠道的作用,包括细胞粘附力和竞争性排除病原菌粘附；功能性研究,分为对胆固醇的作用和对炎症因子的诱导；最后通过小鼠动物模型进行在体检测菌株的安全性和生物活性。根据研究结果,在众多的代谢产物中,乳酸占主导地位；目标菌株大部分抗生素敏感,包括四环素、万古霉素,两者都和临床疾病相关；6株菌对极端胃肠道条件具有耐受；肠道上皮细胞作为粘附基质时,菌株的粘附性较强,其中,L1,L2,L5粘附性较强,并能有效排除抑制病原菌对肠道粘附；而且,L1和L2能诱导炎症因子产生免疫调节反应,但不会对机体造成伤害。挑选鼠李糖乳杆菌L1进行动物活体实验,发现L1对机体无毒副作用,而且能提高淋巴T细胞的含量,具有改善机体免疫力的活性。研究结果表明,鼠李糖乳杆菌L1能作为潜在益生菌使用,并可能对人体免疫水平提高有帮助。肠球菌L2也可能作为益生菌候选菌,但是还需要通过进一步的活体实验验证其安全性和功能性。