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目的传统药物在杀死肿瘤细胞的同时对正常细胞也有严重的杀伤作用,难以进行长期治疗,而诱导分化的治疗方法产生的毒副作用较轻,效果显著且有利于长期治疗。本实验拟通过低剂量力达霉素对慢性粒系白血病K562细胞诱导分化的作用研究,探讨低剂量力达霉素对白血病的治疗作用。方法常规培养K562细胞,取处于对数生长期的细胞,应用不同浓度的力达霉素分别作用K562细胞48 h和72 h。采用CCK-8法及台盼蓝染色法,检测不同浓度力达霉素对细胞增殖能力的影响。通过瑞氏吉姆萨染色法观察细胞形态学变化,NBT法测定力达霉素对K562细胞的分化作用,检测血红蛋白含量变化,流式细胞术检测K562细胞表面红系分化抗原CD71的表达量,提取蛋白用Western-blot方法检测相关蛋白GATA-1含量的变化等,观察不同浓度力达霉素诱导白血病细胞分化的作用。结果1不同浓度力达霉素作用K562细胞48 h,72 h后,对细胞生长均有一定的影响。CCK-8结果显示力达霉素作用K562细胞48h后,随着药物浓度增高,细胞存活率依次为(97.5±0.32)%、(83.1±0.67)%、(60.3±1.24)%、(50.8±0.85)%、(42.7±1.07)%、(33.2±0.98)%、(23.5±1.62)%;分别用作用K562细胞72 h后,K562细胞存活率依次为(89.5±0.74)%、(71.2±1.31)%、(53.6±1.14)%、(44.8±0.55)%、(34.7±1.74)%、(20.4±1.97)%、(12.3±1.43)%。台盼蓝染色结果显示,浓度为0.001 nmol/L、0.1 nmol/L、和10 nmol/L的力达霉素分别作用K562细胞48 h后,细胞的抑制率分别为(26.3±1.5)%、(51.4±1.7)%、(70.8±2.4)%;力达霉素作用K562细胞72h后,细胞抑制率依次为(33.6±1.1)%、(64.2±0.8)%、(82.1±1.4)%。2不同浓度力达霉素对K562细胞作用48 h和72 h后,对其有一定的诱导分化作用。瑞氏吉姆萨染色结果显示,对照组细胞形态规则,大小均等,细胞内见多个核仁,实验组细胞体明显变小,细胞大小不均等,有部分细胞核消失。NBT还原实验结果显示,实验组阳性率显著增高(P<0.05)。力达霉素诱导48 h后的细胞内血红蛋白含量分别为0.562±0.116μg/L、0.833±0.314μg/L、0.703±0.204μg/L;诱导72 h后细胞内血红蛋白含量为0.614±0.332μg/L、1.157±0.162μg/L、0.827±0.174μg/L,相较于正常细胞内的血红蛋白含量0.273±0.024μg/L(48 h)、0.341±0.052μg/L(72 h)都有明显增加。流式细胞检测结果显示,力达霉素诱导48 h后细胞表面抗原CD71表达分别为10.1%、16.7%、5.4%,相较于对照组0.002%有一定的增高。力达霉素诱导72 h后细胞表面抗原CD71表达分别为26.3%、71.4%、9.3%,相较于对照组0.04%有显著的增加(P<0.05)。Western-blot显示,浓度为0.001nmol/L、0.1 nmol/L和10 nmol/L的力达霉素分别作用K562细胞48 h后,GATA-1蛋白表达量分别为(2.88±0.15)、(4.14±0.17)、(3.69±0.08)与对照组(1.26±0.04)相比,GATA-1蛋白表达量升高,且与药物浓度成正相关。分别作用K562细胞72 h后GATA-1蛋白表达量分别为(3.07±0.03)、(4.87±0.09)、(4.26±0.13)与对照组(1.48±0.02)相比,GATA-1蛋白表达量升高,且与药物浓度成正相关。结论1力达霉素对人白血病K562细胞具有抑制增殖作用,且与药物浓度及作用时间均成正相关。2力达霉素可诱导人白血病K562细胞向红系方向分化,且低剂量诱导效果更好。3低剂量力达霉素诱导人白血病K562细胞分化,可能与GATA-1转录因子表达上调有关。