四君子汤对D-gal衰老模型小鼠抗自由基损伤及端粒酶活性影响的实验研究

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二十世纪末的1999年,是联合国大会确定的“国际老年人年”,这表明老龄问题已引起国际社会的普遍关注和重视。加强衰老机理与延缓衰老的研究是新世纪医学领域的重大研究课题。中医药在延缓衰老方面有着广阔的应用前景。 中医学认为,人体衰老与脏腑经络、气血阴阳及精气神密切相关。脏腑之中尤以先天之本肾和后天之本脾关系最为密切。脾为后天之本,气血生化之源,主运化,主升清,与人体生长壮老已息息相关。脾虚是衰老的起始因素及衰老过程中渐见加重的病理过程,因此健脾可以延缓人体衰老。四君子汤是中医学健脾益气的代表方剂,其药味组成中全部为《神农本草经》之上品,有“轻身延年”之功效。现代药理研究也表明,四君子汤能提高人体抗氧化酶活性,增强免疫功能。本研究在以往研究基础上,根据衰老的自由基学说和端粒学说,进一步观察探讨四君子汤延缓衰老作用机制,为中医药关于脾虚衰老理论提供依据,为把四君子汤作为延缓衰老药开发利用奠定基础。 本研究的主要内容包括: 1、四君子汤对D-半乳糖(D-gal)衰老模型小鼠学习记忆能力的影响 采用小鼠跳台法,观察并记录小鼠呆在安全区的时间(Ts)、呆在错误区的时间(Te)、潜伏期时间(LP)及错误次数(Ne)。 2、四君子汤对D-gal衰老模型小鼠心、脑、肝脏组织超氧化物歧化酶(SOD)活性的影响 采用MTT法,检测了各组小鼠心、脑、肝脏组织SOD活性,经统计学处理,比较了各组小鼠心、脑、肝脏组织SOD活性的变化。摘要 3、四君子汤对D一gal衰老模型小鼠肝脏组织谷眺甘肤过氧化物酶(GSH一]〕x)活性的影响 采用DINB法,检测了各组小鼠肝脏组织GSH一Px活性,经统计学处理,比较了各组小鼠肝脏组织GSH一Px活性的变化。 4·四君子汤对D一gal衰老模型小鼠心、脑、肝脏组织脂质过氧化物的分解产物丙二醛(MDA)含量的影响 采用TBA比色法,检测了各组小鼠心、脑、肝脏组织MDA含量,经统计学处理,比较了各组小鼠心、脑、肝脏组织MDA含量的变化。 5、四君子汤对D一gal衰老模型小鼠心、脑、肝、胸腺组织端粒酶活性的影响 采用PCR一ELISA法,检测了各组小鼠心、脑、肝、胸腺组织端粒酶活性,经统计学处理,比较了各组小鼠心、脑、肝、胸腺组织端粒酶活性的变化。 6、四君子汤对D一gal衰老模型小鼠脑组织形态学的影响 采用DMBA45O型生物数码显微图象分析系统,观察了各组小鼠脑海马部位形态学的变化。研究结果表明: 1、四君子汤各剂量组均能改善D一gal衰老模型小鼠的学习记忆能力(Ts延长·Ne减少),尤其是高剂量组能明显提高D一gal衰老模型小鼠的学习记忆能力。 2、四君子汤各剂量组均能提高D一gal衰老模型小鼠心、脑、肝脏组织SOD活性,尤其是高剂量组能使SOD值接近正常对照组的水平。 3、四君子汤各剂量组均能提高D一gal衰老模型小鼠肝脏组织GSH一Px的活性,高剂量的四君子汤能明显提高D一gal衰老模型小鼠肝脏组织中GSH一Px的活性,可致接近正常对照组的水平。 4·四君子汤各剂量组均能减少D一gal衰老模型小鼠心、脑、肝脏组织中MDA的含量,其中中、高剂量组对心脏组织中MDA含量变化影响明显,可致接近正常水平;在脑和肝脏组织中,高剂量组的作用显著,中、低剂量组的作用稍差。 5、四君子汤能明显提高D一gal衰老模型小鼠脑及胸腺组织端粒酶活性;对心脏组织端粒酶活性有提高的趋势,但作用不显著;而对肝脏组织端粒酶活性没有影响。 6、四君子汤能改善D一gal衰老模型小鼠脑组织发生的衰老性改变。 四君子汤延缓衰老作用的可能机制: 1、通过提高机体抗氧化酶(S OD、GSH一Px)的活性,减少MDA的生成,从而摘要减轻自由基对机体的氧化损伤,达到延缓衰老的目的。 2、通过提高模型小鼠心、脑、胸腺组织中端粒酶活性,维持端粒长度和稳定或减缓其缩短速率,从而达到延缓细胞衰老的目的。
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