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麦角生物碱作为色氨酸异戊烯化产物,与多种神经递质(5-羟色胺、多巴胺及α-肾上腺素)有相似的结构,在受体位点上显示出激动剂、部分激动剂或拮抗剂的生理活性,从而影响机体的免疫系统、生殖系统、循环系统、神经系统。作为重要的药物制剂,国内至今无法进行工业化生产。目前国内有关麦角菌生产工艺的研究,多是从国外菌种中心获得麦角菌,文献报道了DSM No.833菌株发酵培养的相关内容,本课题组利用从国外菌种中心获得的DSM No.833菌株进行发酵培养,分析其发酵产物,通过显色反应、TLC、ESI-MS及1HNMR分析,最终确定该菌株的发酵产物中不含麦角生物碱类物质。自然环境下,麦角菌通过感染开花植物的花蕊,在子房处形成菌核,本课题组模拟自然环境,用DSM No.883菌液、DSM No.884菌液、DSM No.885菌液及DSM No.833菌液感染黑麦种子,观察这四种菌株以黑麦种胚或种子作为培养基,能否被活化成活性菌株,实验结果表明黑麦种子未被感染成菌核,DSM No.883、DSM No.884、DSM No.885及DSM No.833未转化成活性菌株。本课题组对双穗雀稗草麦角菌核中的有效成分进行研究,通过显色反应、TLC及ESI-MS分析,推断双穗雀稗草麦角菌核中含有麦角生物碱类物质。本研究尝试从双穗雀稗草麦角菌、竹叶草麦角菌及狐茅麦角菌核中分离具有产麦角生物碱能力的菌株,并进行发酵生产。菌株筛选的过程中,本课题组考察了不同培养基及不同抗生素对于菌株筛选的影响,实验结果表明含有庆大霉素和氯霉素的SP固体培养基更有利于麦角菌的分离,最终从双穗雀稗草蜜露及麦角菌核中分离得到几百株白色真菌。使用48孔深孔板代替常用的摇瓶发酵筛选,建立了一种基于96孔板-酶标仪的双波长紫外分光光度法高通量筛选产碱菌株的方法,从250株白色真菌中筛选出180株具有产碱能力的白色真菌,并利用冷冻干燥保藏法保存菌种。从中挑选一株编号为F50的白色真菌进行发酵培养,分离得到三个单体麦角碱类物质,通过显色反应、TLC、ESI-MS及1HNMR分析发酵产物,最终判断产物YHW-49-D的产物为麦角新碱,其余两个化合物基本判定为羟基-乙基麦角酰胺和麦角酰胺。为提高产量,对产碱菌株F50进行了自然选育和紫外诱变选育,产碱量从最初的30-40ug/ml,提高到2OOug/ml左右,并且经过数次传代实验,保持了稳定的产碱性。之后对产碱菌株F50进行了初步的发酵条件考察,考察了生物量和产碱量与发酵时间的关系,研究结果显示在发酵第11天总碱含量达到最大值,为之后发酵条件的考察打下基础。