聚焦超声对人宫颈癌HELA细胞的体外作用研究

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目的:研究脉冲聚焦超声(Puled Focused Ultrasound, PFU)对人宫颈癌 HELA 细胞的体外作用并探讨其相关机制,为 PFU 应用于宫颈癌治疗奠定理论基础。 方法:消化对数生长期的 HELA 细胞,用聚焦超声(频率 1 MHz,声强 83.6 W/cm2 )辐照细胞不同时间后,采用台盼蓝染色法检测超声辐照对 HELA 细胞的杀伤率;调整辐照后存活的 HELA 细胞密度,采用 MTT法检测 PFU 辐照后不同时间 HELA 细胞的存活率;收集辐照后 6h、12h、24h、48h 的细胞,采用流式细胞仪检测辐照后细胞周期情况;调整辐照10 秒的 HELA 细胞密度,培养 6 小时后,采用 TUNEL 法检测 PFU 辐照后 HELA 细胞凋亡情况;收集辐照后 6h 的细胞,透射电镜下观察 PFU辐照后 HELA 细胞超微结构变化及凋亡小体形成情况;调整辐照 10 秒后的 HELA 细胞密度并行细胞爬片,采用免疫细胞化学法检测 PFU 辐照后HELA 细胞 P53、Bcl-2、Bax 蛋白表达情况。 结果:台盼蓝染色法结果显示:PFU 辐照时间为 10s、20s、30s、40s、50s时,对HELA细胞的杀伤率分别为19.8%、24.3%、46.25%、65.36%、70.51%,随时间延长,细胞死亡率增加,其杀伤率与时间成正比关系。MTT 法检测结果显示:辐照组 HELA 细胞的吸光度值(A570)明显比对照组低,随辐照时间延长,超声对 HELA 细胞的作用增强,HELA 细胞的存
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