蒲公英中黄酮类化合物的提取纯化及应用研究

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本论文以蒲公英为研究对象,对蒲公英中黄酮类化合物进行了提取、纯化工艺研究;对提取物中黄酮类化合物的含量和主要成分进行了紫外分光光度法(UV)和高效液相色谱法(HPLC)的分析检测;并对其抗氧化能力进行了研究。将蒲公英黄酮提取物添加到烟草中,研究其改善卷烟吸味品质的作用及在卷烟中的转移率。研究的主要结果如下:1、对紫外分光光度法检测蒲公英黄酮化合物的可靠性进行了研究。结果表明:检测波长为510nm,精密度RSD值为1.89%,重复性RSD值为0.55%,精密度和重复性的相对标准偏差小于2%,在误差范围内。稳定性RSD值为2.91%,超过允许范围,但在反应20min后立即进行测定可保证结果的稳定性。2、以蒲公英提取物中总黄酮得率为考察指标,通过单因素试验和正交试验优化了微波辅助和超声波辅助两种提取方法,获得了提取蒲公英中黄酮类化合物的最佳工艺参数,结果表明:优化后的微波辅助法提取蒲公英总黄酮工艺参数为:乙醇浓度75%、料液比1:35、萃取时间15min、萃取功率700W,得率为7.09%。优化后的超声波辅助法提取蒲公英总黄酮工艺参数为:乙醇浓度85%、料液比1:30、超声时间35min、超声温度60℃,得率为7.55%。3、利用树脂法对提取所得的蒲公英黄酮类化合物进行纯化研究。通过静态吸附和解析试验选定聚酰胺为最佳吸附树脂;确定的最佳吸附条件为:溶液pH值6,上样量20.00mL;最佳解析条件为:乙醇浓度90%,温度30℃;最佳动态工艺条件为:上样液浓度2.65mg/mL,上样液流速2.0mL/min,洗脱液流速1.5mL/min。4、用紫外分光光度法测定了纯化前后蒲公英黄酮提取物中总黄酮的含量,结果表明:蒲公英提取物中纯化前总黄酮含量为21.07%;纯化后总黄酮含量提高到47.89%。用HPLC法分析了纯化前后蒲公英黄酮提取物中的主要成分槲皮素和木犀草素的含量。结果表明:纯化前槲皮素含量为0.23%,木犀草素含量为0.55%。纯化后槲皮素含量为3.98%,木犀草素含量为4.07%。纯化对提取物中的总黄酮和主要成分含量的提高效果明显。5、对蒲公英总黄酮提取物抗氧化作用研究结果表明:DPPH自由基的清除率随着蒲公英黄酮提取物浓度的增加而增大,纯化后的黄酮提取物比纯化前提取物清除DPPH自由基的能力要强,且比对照品BHT强,但比Vc弱。6、对蒲公英黄酮提取物在卷烟中改善吸味品质的作用进行了研究。结果表明:适量添加了蒲公英总黄酮提取液之后的卷烟使烟气增香、增甜、生津和咽喉部位的刺激感减轻。具有明显改善卷烟吸味品质的作用,可作为植物型卷烟添加剂的有效的备选原料。对其卷烟中的转移率进行了研究,结果表明:转移率规律基本同加芦丁标准品一致,卷烟A、B、C的烟丝转移率分别为4.23%、4.18%、4.09%;滤嘴迁移率未检出;滤嘴截留率、主流烟气转移率都极低。
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