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本实验以胡芦巴中性多糖为研究材料,采用酸解和酶解两种方法水解,并对水解产物进行生物学活性的比较研究。
第一部分主要对胡芦巴中性多糖酸水解的工艺条件进行研究。以还原糖得率为指标,采用L<,9>(3<4>)正交设计对酸浓度、反应时间、反应温度的参数进行优选。结果表明,从水解产物低聚糖产量考虑,6mol/L盐酸浓度,100℃反应温度,lh反应时间为最佳工艺条件,此时低聚糖的得率为43.97%,低聚糖的分子量约为500~1000D;以获得较小分子量的低聚糖为目的,则6mol/L盐酸浓度,90℃反应温度,2h反应时间为最佳试验条件,此时低聚糖的分子量约为300~750D,得率为13.52%。而本实验是以低聚糖产量为实验目的,所以我们认为前者为最佳实验条件。
第二部分对胡芦巴中性多糖酶解的工艺条件进行研究。以还原糖得率为参考指标,采用Lg(3<4>)正交设计对反应温度、反应时间、酶量的参数进行优选。结果表明,反应温度50℃,反应时间9h,酶量6%,最有利于胡芦巴中性多糖的酶解,该条件下的酶解产物经Sephadex G-150柱层析,得到两个主要组分,其均分子量分别为4.5×10<4>D和7.5×10<3>D。
第三部分对酸解和酶解产物进行生物学活性的比较研究。实验发现,两种产物具有一定的清除氧自由基和羟自由基的能力,且与浓度呈量效关系;均能促进双歧杆菌、乳酸杆菌的生长,抑制大肠杆菌的生长,且相同浓度的情况下,酶解产物对肠道菌群生长的影响更明显;对4种植物病原真菌即葡萄灰酶、蚕豆褐班、棉红腐、茄子菌核具有较为明显的抑制作用;对Hela、U251等肿瘤细胞具有较强的抑制作用;抑制S180肿瘤细胞的生长。