烟粉虱唾液蛋白Bt56靶向植物蛋白NTH202调控植物水杨酸途径

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烟粉虱Bemisia tabaci(Hemiptera:Aleyrodidae)是半翅目粉虱科的一类重要的农业害虫。近年来,Middle East-Asia Minor 1(MEAM1)、Mediterranean(MED)烟粉虱入侵危害,已对我国农业生产造成了严重影响。作为一种刺吸式口器植食性昆虫,烟粉虱在取食寄主植物韧皮部汁液的同时分泌唾液帮助取食并调控植物的防御反应。截止到目前为止,只有少数刺吸式口器植食昆虫的唾液蛋白被鉴定,更为重要的是,这些蛋白的功能及调控植物防御反应的作用与机理仍不清楚。因此,本文探究了烟粉虱唾液蛋白Bt56在烟粉虱-植物互作中的作用及其调控植物水杨酸信号途径的部分机制。实验室前人研究表明,烟粉虱的唾液蛋白Bt56是一个含有信号肽的小分子蛋白,在烟粉虱唾液腺主腺中特异性表达,能够通过诱导植物水杨酸(salicylic acid)信号途径促进烟粉虱在烟草上的存活。本研究通过酵母双杂交实验发现MED,MEAM1,Asia Ⅱ 1,Asia 113和China2等多个隐存种的烟粉虱唾液蛋白Bt56均能够与烟草NTH202互作,并进一步对MED烟粉虱中的Bt56通过GST Pull-down和双分子荧光互补(BiFC)的手段进一步进行了验证。烟粉虱取食和过表达Bt56均显著降低烟草中NTH202基因的表达水平。通过VIGS(virus induced gene silencing)的方法沉默烟草中NTH202基因对烟草的表型没有明显影响,但显著提升烟粉虱在烟草上的存活率和产卵量。未被烟粉虱取食时,沉默NTH202基因的烟草中水杨酸含量与对照烟草相比没有显著差异;烟粉虱取食后,沉默NTH202基因的烟草和对照烟草中的水杨酸含量均显著上调,但沉默NTH202基因的烟草中的水杨酸含量显著高于对照烟草中的水杨酸含量。因此,我们推测NTH202除了在烟草中发挥其作为转录因子调控植物基因表达的作用外,可能在烟草中还有其他未知的功能,烟粉虱在长期的进化中获得了保守地调节该蛋白的功能的能力,即分泌Bt56调节NTH202功能,从而帮助烟粉虱更好的取食。综上所述,本研究发现了一个能与烟粉虱唾液蛋白Bt56互作的烟草NTH202蛋白,初步解析了其在烟粉虱-植物互作中的作用。本研究初步揭示了烟粉虱唾液效应因子Bt56调节寄主植物水杨酸信号途径的机制,这对我们了解烟粉虱的入侵机制、选育抗虫作物品种、发展新型烟粉虱的防控策略具有重要的指导意义。
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