【摘 要】
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抗生素自身的弱点促使人们开发新型药物来克服日益严重的细菌耐药性问题.该研究将脱氧核酶反义技术引入细菌耐药性治疗应用领域.在这里,我们针对青霉素耐药基因TEM族系β—内
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抗生素自身的弱点促使人们开发新型药物来克服日益严重的细菌耐药性问题.该研究将脱氧核酶反义技术引入细菌耐药性治疗应用领域.在这里,我们针对青霉素耐药基因TEM族系β—内酰胺酶mRNA的设计了两个单价10-23结构脱氧核酶D<,Z<,1>>、D<,Z<,2>>和一个双价脱氧核酶D<,Z<,1-2>>,它们无论是在体外,还是在体内均表现出较高的酶活力.D<,Z<,1-2>>的体内作用效果最好,这说明构建多价脱氧核酶是提高脱氧核酶体内酶活力的一种行之有效手段.总之,该实验初步证明了脱氧核酶具有成为一种细菌耐药性抑制剂的潜在可行性.为了实现脱氧核酶的体内复制,我们针对青霉素耐药基因TEM联系β—内酰胺酶mRNA还设计了一个新型环状结构脱氧核酶C-D<,Z<,482>>.这种全新结构的脱氧核酶是通过将10—23结构脱氧核酶克隆到M13mp18单链DNA载体中构建而成,其不仅成功地实现了自身体内复制,而且无论是在体外,还是在体内均表现出较高的酶活力.此环状脱氧核酶在各种条件下的理化性质极其相似,这暗示其作用机制可能与线性脱氧核酶相同.总之,环状结构脱氧核酶是一种新型结构的脱氧核酶,它为脱氧核酶的体内复制提供了一条新途径,并为脱氧核酶今后的发展拓展了更为广阔的空间.
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