我们针对肿瘤细胞在化疗过程中产生的多药抗性(Multidrug resistance,MDR)现象,选择临床上应用成熟的抗癌药物--阿霉素(Doxorubicin),对mdr1基因中翻译起始区30-11位置的一段20mer的反义核酸进行共价偶联修饰.在对合成修饰工艺进行了详细研究的基础上,对该偶联物的性质及在体内、体外抑制多药抗性肿瘤细胞的生长及其作用机理进行了大量研究.通过建立抗性肿瘤细胞的裸小鼠动物模型,比较考察了偶联物和反义寡核苷酸逆转体内肿瘤的多药抗性的作用.研究表明偶联物能够更好的促进阿霉素诱导的获得多药抗性的肿瘤细胞的凋亡,肿瘤抑制率达到68.1％,而反义寡核菅酸处理后仅能达到33.3％.对肿瘤组织的Western Blot和RT-PCR研究表明,反义寡核苷酸在体内抑制P-gp蛋白的作用表明的不明显,而偶联物对肿瘤组织细胞内的P-gp蛋白表达也有明显的抑制作用.综上所述,体外和体内的研究表明,采用阿霉素对寡核苷酸进行共价偶联修饰,一方面使反义寡核苷酸获得了更好的稳定性,促进了其穿透细胞膜的能力,使得进入肿瘤细胞里的反义寡核苷酸的量有较大的增加,同时,由于偶联物中阿霉素的存在,提高了反义寡核苷酸与其靶序列的亲和能力,使其针对mdr1基因转录和P-gp蛋白表达的反义效率得到了较大的提高;另一方面,偶联物中的阿霉素可以有效嵌入mdr1基因,发挥切断靶基因的功能,使偶联物具有更强的抑制肿瘤细胞多药抗性基因的表达的作用.肿瘤细胞的多药抗性问题是临床化疗的一大障碍,成因十分复杂.通过反义技术来攻克这一难题虽然透出了一线曙光,但要完全逆转多药抗性、克服这一大障碍还有许多工作要做.该研究采用目前肿瘤化疗的重要临床药物-阿霉素对反义寡核苷酸进行结构修饰,是一种更加有效的发挥反义药物应用价值的思路和方法,为提高药物性能,推进药物走向临床应用提供了依据.虽然现阶段的研究与实际的药物开发还有很大的距离,但这些基础研究工作,以及相关实验方法和技术的建立,为今后的药物设计和开发提供了技术储备,奠定了坚实的基础,有望为最终攻克肿瘤细胞的多药抗性提供一种有效手段.