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三七是我国的传统名贵中药,微生物发酵三七可产生生理活性更高、应用价值更大的产物,具有较好的应用开发前景。本研究采用三种虫草属真菌:蝙蝠蛾拟青霉(Paecilomyces hepiali Chen&Dai)、蛹草拟青霉(Paecilomyces militaris Liang)和蝉拟青霉(Paecilomyces cicadae Samson)分别对三七原药材进行液体发酵,检测发酵产物中三七和虫草的功效成分含量。采用高效液相色谱法(HPLC)定量分析发酵前后皂苷单体成分的变化;用高效液相色谱法(HPLC)定量分析虫草素和腺苷的含量;采用比色法测得发酵产物的甘露醇含量。结果表明,蝙蝠蛾拟青霉、蛹草拟青霉的液体发酵产物中Rd为原药材灭菌对照的4倍,高产人参皂苷Rd,同时合成腺苷、虫草素和甘露醇。以三七原药材为底物,用蝙蝠蛾拟青霉、蛹草拟青霉和蝉拟青霉分别对其进行固态发酵。三种虫草属真菌均可在三七培养基中良好生长。其中蝙蝠蛾拟青霉和蛹草拟青霉的固态发酵产物中人参皂苷Rd为原药材灭菌对照的5倍多,可高产Rd;腺苷和甘露醇含量与野生的冬虫夏草相当;而蛹草拟青霉的发酵产物中虫草素含量为868.53μg/g,远高于野生冬虫夏草中虫草素含量。以总皂苷、人参皂苷Rd、腺苷、虫草素和甘露醇为指标,优化蝙蝠蛾拟青霉、蛹草拟青霉固态发酵三七的最佳发酵时间分别为16d和20d。此时,蝙蝠蛾拟青霉的固态发酵产物中,人参皂苷Rd的含量是其液体发酵产物中的含量的1.25倍,总皂苷和腺苷含量与之相当,而甘露醇的含量则稍低于其液体发酵产物。蛹草拟青霉的固态发酵产物中,人参皂苷Rd和虫草素是其液体发酵产物的1.33倍和18.87倍,总皂苷、腺苷和甘露醇含量则稍低于其液体发酵产物。通过硅胶柱层析及重结晶方法,从三七原药材中提取出三七总皂苷。优化蝙蝠蛾拟青霉和蛹草拟青霉的培养基和发酵时间,TLC分析其对三七总皂苷和人参皂苷Rbl的转化。研究表明,蝙蝠蛾拟青霉和蛹草拟青霉有高效转化Rbl为人参皂苷Rd的活性,且转化人参皂苷Rbl为Rd的为其胞内酶。本研究采用药食兼用的虫草真菌发酵三七获得生理活性较强的稀有皂苷,同时合成腺苷、虫草素和甘露醇等虫草的功效成分,实现一次发酵过程获得虫草和三七的药用成分,为药用微生物与植物药相互作用获得丰富的、新的药用资源开辟了途径。