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目的:筛查鉴定脑源性LncRNA中参与调控神经细胞存活的miRNAs及其调控机制。方法:通过Pubmed,miRNA库及预测软件对我们前期发现的6.1kb脑源性LncRNA进行同源序列比对及可能的miRNAs的筛查和定位,将构建成功的候选miRNAs过表达载体使用脂质体转染法转染至原代培养的大鼠胚胎脑皮质神经细胞中,在神经细胞死亡诱导实验中观察转染候选miRNAs过表达载体组和阴性对照组的原代培养的大鼠胚胎脑皮质神经细胞死亡率的变化情况,并通过qPCR、Western blotting检测候选miRNAs的相关靶基因及BDNF的表达变化。结果:(1)通过筛查和预测软件确定了候选miRNAs的位点及序列。(2)成功构建候选miRNAs过表达载体及阴性对照。(3)原代培养的大鼠胚胎脑皮质神经元的鉴定。(4)miR-4在神经细胞死亡诱导实验48 h中表现出对神经元存活的保护功能,在神经细胞死亡诱导实验48h中转染miR-4过表达载体组的大鼠胚胎脑皮质神经细胞死亡率对比阴性对照组明显下降,并具有统计学意义(P<0.05)。(5)重复验证miR-4的神经元存活保护功能,miR-4在神经细胞死亡诱导实验48h中表现出对神经元存活的保护功能,死亡率对比阴性对照组明显下降,并具有统计学意义(P<0.05),与初筛结果一致。(6)检测miR-4的相关靶基因Mapk10,Snap25,Ncan,Atp2b3,CNA2D2,INHBA,CAMTA1,CALCOCO1的mRNA相对表达水平,结果显示:转染miR-4过表达载体组的大鼠胚胎脑皮质神经细胞中Ncan,Atp2b3,CACNA2D2,CALCOCO1 mRNA表达水平与阴性对照组和空白组比较显著下降,且差异具有统计学意义(P<0.05)。(7)检测BDNF的mRNA表达水平,结果显示:转染miR-4过表达载体组的大鼠胚胎脑皮质神经细胞中BDNF的mRNA表达水平与阴性对照组和空白组比较显著升高,且差异具有统计学意义(P<0.05)。(8)检测BDNF的蛋白表达水平,结果显示:转染miR-4过表达载体组的大鼠胚胎脑皮质神经细胞中BDNF的蛋白表达水平与阴性对照组和空白组比较显著升高,且差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:6.1kb脑源性LncRNA对神经细胞的存活保护机制可能是通过miR-4的调控作用实现的。其中miR-4通过上调间接下游基因BDNF的表达量,从而促进神经细胞存活保护机制产生。