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目的:研究刺参酸性粘多糖(SJAMP)对人肝肿瘤HepG2细胞增殖的抑制作用,探讨其对HepG2细胞增殖有关的基因和蛋白表达的影响,为揭示刺参酸性粘多糖抗肝肿瘤作用提供依据。方法:人肝肿瘤HepG2细胞常规培养于含10%胎牛血清的高糖DMEM培养基,人正常肝细胞张氏细胞常规培养于含10%胎牛血清的PRMI-1640培养基,两种细胞置于37℃、含0.05%(体积分数)C02的细胞培养箱中。取对数生长期的细胞,培养基中加入刺参酸性粘多糖进行干预,浓度依次为0、0.5、2.0、8.0μg/ml。干预一定时间后,透射电镜观察细胞结构的变化,MTT实验观察刺参酸性粘多糖对细胞增殖的影响,流式细胞术检测细胞周期,免疫细胞化学法检测增殖细胞核抗原(PCNA)、P21、P53、MDM2、pRb、 E2F-1、cyclinD1、CDK4蛋白的表达,实时荧光定量PCR(Real-time PCR,RT-PCR)检测P53、MDM2、、pRb、E2F-1、cyclinD1、CDK4mRNA的表达。结果:透射电镜观察发现,SJAMP干预后的HepG2细胞内部形态发生改变并见细胞脱落状凋亡;MTT实验结果表明SJAMP能够抑制HepG2细胞增殖,且随着干预剂量(0、0.5、2.0、8μg/ml)增加和干预时问(12h、24h、48h)延长抑制作用增强(F<0.05), SJAMP对张氏细胞增殖没有显著的抑制作用(P>0.05)。流式细胞术检测细胞周期结果显示,SJAMP使HepG2细胞细胞周期发生G1期停滞,且随着SJAMP干预剂量的增加,HepG2细胞停留在G1期的细胞增加,G2期和S期的细胞相应减少,差别有统计学意义(P<0.05), SJAMP干预后张氏细胞细胞周期未发生显著改变(P>0.05)。免疫细胞化学检测结果表明,随着SJAMP作用剂量的增加,HepG2细胞PCNA的表达降低,P21蛋白表达升高,各组差异有统计学意义(P<0.05),张氏细胞PCNA和P21蛋白表达随着SJAMP干预剂量的变化未发生显著改变(P>0.05)。RT-PCR检测结果显示,随着SJAMP作用剂量的增加,HepG2细胞P53、MDM2、E2F-1、cyclinD1以及CDK4mRNA的表达均降低,pRb mRNA的表达增加,差别有统计学意义(P<0.05),各组张氏细胞上述指标mRNA的表达未发生显著改变(P>0.05)。免疫细胞化学检测结果显示,SJAMP干预后,HepG2细胞P53、MDM2、E2F-1、cyclinD1以及CDK4蛋白的表达降低,pRb蛋白的表达升高,且随着SJAMP干预剂量的增加而变化,差异有统计学意义(P<0.05),各组张氏细胞各蛋白表达未发生显著变化(P>0.05)。结论:刺参酸性粘多糖能够抑制人肝肿瘤HepG2细胞的增殖,其机制可能为SJAMP通过抑制PCNA、抑癌基因P53及其蛋白、癌基因MDM2及其蛋白的表达以及作用于细胞周期G1期的Rb-E2F通路,抑制其E2F-1、cyclinDl、CDK4基因及蛋白的表达,促进pRb和P21基因及蛋白的表达,使HepG2细胞发生G1期阻滞。同时,SJAMP对正常肝细胞张氏细胞的生长没有影响。