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p62/SQSTM1是参与细胞代谢和应激反应的重要信号传导中心,作为“脚手架”蛋白,p62通过与不同信号分子相互作用,调控细胞自噬、氧化应激和天然免疫。天然免疫是宿主防御外来入侵病原体的第一道防线,宿主通过胚系基因编码的模式识别受体识别病原相关分子模式进而激活下游信号通路,产生多种细胞因子抵抗病原体侵袭。针对RNA病毒,宿主主要利用膜结合的Toll样受体和胞质中的RIG-I样受体识别病毒核酸。在RIG-I样受体介导的细胞I型干扰素免疫应答中,TBK1作为激酶直接催化重要调控因子IRF3磷酸化,诱导I型干扰素IFN-β产生发挥抗病毒作用。同时TBK1还催化NF-κB相关蛋白磷酸化,激活转录因子NF-κB,是联系I型干扰素信号通路和NF-κB信号通路的关键激酶。以往研究发现p62通过与TRAF6等分子相互作用调控NF-κB的激活,而TRAF6还参与细胞I型干扰素的产生。在病毒诱导的天然免疫应答中,关键接头分子MAVS被模式识别受体活化后招募TRAF6,利用TRAF6促进IKKγ的泛素化使之活化进而招募TBK1等分子,激活I型干扰素表达。鉴于p62可调控TRAF6的活性影响NF-κB活化以及TBK1作为关键激酶联系着NF-κB信号通路和I型干扰素信号通路,p62可能也参与宿主I型干扰素免疫应答,然而p62是否影响病毒感染诱导的I型干扰素产生目前尚不清楚。本研究旨在明确p62对RNA病毒诱导IFN-β产生的影响及其作用机制。我们发现敲减p62可导致RNA病毒感染诱导的细胞IRF3二聚化减弱、ISRE报告质粒表达水平和IFN-β mRNA水平下调,表明干扰p62的表达可影响宿主细胞I型干扰素的产生并且通过进一步实验发现p62作用于IRF3上游。通过免疫共沉淀我们发现p62与TBK1相互作用,而且敲减p62可抑制IRF3的磷酸化。利用体外激酶实验并检测TBK1磷酸化水平,我们发现敲减p62可导致TBK1 Ser172位磷酸化水平下调抑制TBK1激酶活性从而抑制TBK1催化IRF3磷酸化。通过体外磷酸酶实验我们发现细胞敲减p62导致的TBK1 Ser172磷酸化减弱是由磷酸酶PP2A活性增强催化TBK1去磷酸化引起的。此外我们还发现敲减p62可促进仙台病毒SeV、水疱性口炎病毒VSV和呼吸道合胞病毒RSV的复制。综上所述,本研究发现在RNA病毒感染诱导的天然免疫应答中p62通过抑制磷酸酶PP2A对TBK1去磷酸化调控TBK1激酶活性的分子机制,为自噬与天然免疫相互调控提供了新的机制,进一步丰富了对细胞自噬与天然免疫相互联系相互调控共同发挥抗病毒作用的认识,为寻找潜在抗病毒药物靶点提供了新方向。