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本文首先利用血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)诱导人脐静脉内皮细胞(HUVECs)建立氧化损伤模型模拟体外高血压细胞损伤模型,其次通过考察细胞形态、细胞活性、微观结构、细胞凋亡以及检测细胞功能中氧化损伤标志物丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)含量、一氧化氮合酶(NOS)和超氧化物歧化酶(SOD)的活力来评价芹菜苷与3-甲氧基芹菜苷的修复效果,进而选取功能活性较强的芹菜苷,再通过实时荧光定量PCR(real-time PCR)、蛋白质印迹法(Western Blot)等技术来研明芹菜苷对血压调节的细胞外调节蛋白激酶(ERK1/2)信号通路的影响,从而阐明芹菜苷在血管内皮细胞中发挥修复作用的途径,为芹菜黄酮调节血压研究提供理论基础,同时为高血压病患者日常膳食提供有效的建议。主要的实验结果及结论如下：(1)以HUVECs为模型细胞,Ang Ⅱ为诱导剂,筛选诱导剂的浓度和诱导时间对HUVECs氧化应激损伤的影响。实验发现Ang Ⅱ能明显的诱导内皮细胞的氧化损伤,主要表现为细胞形态变化,细胞器细胞膜结构损伤,细胞活性下降,凋亡率上升,细胞脂质过氧化增加,细胞的分泌功能如NO释放率、eNOS、SOD活力降低。其中1μmol/L AngⅡI诱导12 h时各项指标为细胞活性为65.11%,NO含量43.57 μmol/L, TNOS活力为6.99U/mgprot, eNOS活力为1.89U/mgprot,MDA含量为7.46 nmol/mgprot, SOD活力为144.88U/mgprot,细胞凋亡率为(41.5±2.6)%,微观结构显示核膜皱缩,核仁消失,胞浆内出现大量空泡状结构,线粒体或者细小或者肿胀,粗面内质网扩张数目较少,部分核糖体丢失,平面内质网扩张,但细胞未解体,仍然保持细胞结构。(2)以芹菜苷、3-甲氧基芹菜苷标准品为研究对象,通过与建立损伤模型相同的技术考察两者对模型的修复情况。实验发现两者均可以增加细胞活力,增加NO释放量,清除自由基,减少细胞内过氧化物的产生,降低细胞凋亡率,修复细胞器细胞膜结构等,且上述功能在芹菜苷、3-甲氧基芹菜苷浓度低于50 μmol/L时随时间呈剂量依赖增加关系,高于50 μmol/L时修复细胞的功效开始降低。说明两者均具有一定程度的修复损伤的内皮细胞作用。具体结果为：50 μmol/L芹菜苷修复12h时,各指标分别为细胞活力79.07%,NO含量为139.22 μmol/L, TNOS活力为26.32 U/mgprot, eNOS活力为16.32 U/mgprot, MDA含量为5.47 nmol/mgprot, SOD活力为51.51 U/mgprot,细胞凋亡率下降到(14.7±1.2)%,微观结构显示细胞核仁基本完整,胞浆内空泡减少,粗面内质网及核糖体数目未见减少,形态未见明显病变。50μmol/L3-甲氧基芹菜苷修复12 h时,各指标分别为细胞活力64.50%,NO含量为78.88 μmol/L, TNOS活力为19.94 U/mgprot, eNOS活力为12.41 U/mgprot,MDA含量为7.93 nmol/mgprot, SOD活力为44.32 U/mgprot,细胞凋亡率下降到(33.7±1.7)%,微观结构显示细胞器数量减少,仍有部分线粒体肿胀。说明3-甲氧基芹菜苷在一定程度上同样具有减缓血压症状的作用,其发挥作用的规律与芹菜苷类似,但效果不如芹菜苷。综合两者的作用效果,最终选择50 μmol/L芹菜苷修复12 h来研究芹菜苷对ERK1/2信号通路的作用。(3)ERK1/2信号通路是与高血压相关的信号通路之一。实验发现,在AngⅡ诱导的模型中加入芹菜苷,ERK1、ERK2的mRNA表达分别降低7.84%、22.28%,磷酸化蛋白表达分别降低30.91%、11.33%,说明芹菜苷可以抑制磷酸化ERK1、ERK2的mRNA和蛋白表达来发挥降血压作用。实验还发现芹菜苷能够抑制ERK1/2的下游产物ACE的mRNA和蛋白表达,进而减少细胞损伤,同时芹菜苷能够激活eNOS的mRNA和蛋白表达,发挥释放NO的作用,从而修复内皮细胞损伤。这种效果在加入ERK1/2特异性抑制剂U0126后更为明显。