论文部分内容阅读
本文立足我国辣椒生产实际,从不同植物根际土壤中分离筛选对辣椒疫霉有效的拮抗菌株,对拮抗菌株的温室防病促生效果、田间防效以及分类鉴定进行了研究,并进一步研究了拮抗菌株的拮抗机理,以期为通过生物学途径改良设施连作土壤和控制蔬菜土传病害提供依据。主要结果如下:
(1)本研究用稀释分离法对南京、扬州等地区的67份土壤样品进行放线菌和细菌的分离,共分离到放线菌264株,细菌382株。通过平板对峙培养,筛选出拮抗辣椒疫霉的菌株,其中放线菌的比例较高,为44.1%:而细菌所占比例则较低,仅为8.5%。测定了抑菌活性较强的13株菌株(抑制率为58.9%~78.9%).对6种植物病原真菌的拮抗作用结果表明:拮抗菌bGVl-1、bNV5-4、bYD2-7、bND6-4、bGD3-1和bGD2-6以及放线菌aND5-1、aGD6-2和aNP6-7对供试的6种病原真菌均有较强的抑菌作用,平均抑制率在63%以上。
(2)防病促生试验:盆栽试验表明,经拮抗菌bGVl-1、aNP6-7、aND5-1和bYD2-7处理后防效达到55.23~69.52%,防治效果较好。温室促生试验表明:拮抗菌bGVl-1和aNP6-7对辣椒的生长有明显的促生作用;在田间试验中,拮抗菌和化学农药复合使用时,与单独使用农药以及单独使用拮抗菌的防效比较,明显增强防治效果,接种30d防效达70.88%-69.61%。
(3)对筛选出的两株防病促生效果明显的菌株进行了拮抗机理的研究:结果表明,bGVl-1无几丁质酶活性,但可以分泌蛋白酶和纤维素酶,可以产生嗜铁素和凝集素,这说明其产生的蛋白酶、纤维素酶、嗜铁素以及凝集素在抗真菌上发挥了一定得作用,当然,这并不排除除上述物质以外的其他酶或未知拮抗成分也在拮抗过程中发挥着作用。拮抗菌aNP6-7除分泌蛋白酶,纤维素酶、几丁质酶和凝集素外,无菌滤液试验证明其还可以产生抗真菌物质。诱导抗性试验结果显示:经aNP6-7和bGVl-1处理并同时接种辣椒疫霉后,叶部组织中的四种防御酶活性都明显高于其他处理,单独接种aNP6-7处理24h后4种防御酶活性均升高,但在bGVl-1处理中,PPO活性变化基本接近对照水平。MDA含量与对照相比无明显变化,表明2株拮抗菌对辣椒植株没有伤害。
(4)菌株鉴定:利用形态学鉴定、生理生化特性鉴定及细菌的16SrDNA序列相结合的方法,分别将菌株bGVl-1和aNP6-7鉴定为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)和橄榄色链霉菌(Streptomyces olivaceus)。