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目的用mTOR通路抑制剂雷帕霉素(rapamycin)对胆管癌QBC939细胞株进行处理,探讨雷帕霉素对胆管癌QBC939细胞体外抗增殖及细胞周期影响,并初步探讨其分子机制。方法(1)使用MTT法检测rapamycin对QBC939细胞株体外增殖的影响;(2)使用流式细胞仪检测rapamycin对QBC939细胞株细胞凋亡和细胞周期的影响;(3)采用Western blot法检测rapamycin对QBC939细胞株mTOR, p-mTOR蛋白表达量的影响;(4)采用实时荧光定量PCR检测rapamycin对QBC939细胞株mTOR mRNA表达量的影响;结果(1)MTT法检测结果显示:不同浓度rapamycin(2.5、5、10、20、40和80nM)对QBC939细胞体外增殖有抑制作用,与对照组相比较,差异具有显著统计学意义(P<0.01);DMSO组与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。(2)流式技术细胞凋亡检测结果显示:不同浓度rapamycin(2.5、5、10、20、40和80nM)均能促进QBC939细胞凋亡,与对照组相比较,差异具有显著统计学意义(P<0.01);DMSO组与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。细胞周期检测结果显示:2.5nM rapamycin处理组与对照组相比较QBC939细胞出现明显的GO/GI期阻滞现象,G1期细胞比例显著增多(P<0.01),相应的处于S期的细胞比例减少。(3)Western blot法检测结果显示: rapamycin处理组(5、10和20nM)mTOR蛋白表达量与对照组相比较未见明显变化(P>0.05),P-mTOR蛋白表达量出现明显下降,其中5nM处理组差异有统计意义(P<0.05),10nM和20nM处理组差异具有显著性(P<0.01)。(4)实时荧光定量结果显示rapamycin处理组(5、10和20nM)mTOR mRNA表达量与对照组相比没有明显变化(P>0.05)。结论(1)rapamycin能够抑制QBC939细胞体外增殖(2)rapamycin能够诱导QBC939凋亡并且抑制其细胞周期进程。(3)rapamycin不直接影响mTOR蛋白和mTOR mRNA的表达水平。(4)rapamycin能够抑制降低QBC939细胞P-mTOR蛋白的表达水平。