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本研究通过对比淡水发光细菌青海弧菌荧光素酶基因luxAB和luxCDABE在以pET-22b为载体以BL21(DE3)为宿主菌的表达体系中的表达,为构建特异性检测毒性的重组菌提供基础。以青海弧菌基因组DNA为模板,设计引物扩增得到青海弧菌Q67荧光素酶基因luxAB和luxCDABE,将其分别与表达载体pET-22b连接,转化大肠杆菌DH5α测序,阳性质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)进行表达。检测两种重组菌的发光特性,通过测定重组菌的相对发光强度(RLU)和OD600值可知:luxAB和luxCDABE重组菌都在癸醛和IPTG浓度均为1μL/mL培养基里培养第一个小时后达到最大RLU,值分别为750618.5和140901.5,luxAB重组菌相对发光强度更大,与已有研究结果不同。未添加癸醛作为发光底物的重组菌液均未检测到发光强度,说明luxCDE基因在重组菌里没有得到表达,原因可能是该表达体系不适合其表达,也有可能是发光细菌本身的代谢产物阻碍了其表达。为了进一步验证青海弧菌荧光素酶基因在大肠杆菌中的表达效果并实现重组菌的初步应用,检测了重金属离子Cd2+、Hg2+、Cr6+对重组菌的毒性,通过计算相对发光强度进行直线拟合,计算得到EC50值(半有效浓度)分别为:luxAB重组菌:5.160、5.129、7.097mg/L;luxCDABE重组菌:6.137、7.643、7.736mg/L。在相同培养条件下,LuxAB重组菌比luxCDABE重组菌获得了更大的RLU,说明在本实验的体系中luxAB表达效果更好,luxAB重组菌检测重金属毒性得到了更低的EC50值进一步论证了这个观点。本实验实现了青海弧菌荧光素酶基因的表达,并成功地对其重组菌进行了初步应用,这为青海弧菌荧光素酶基因的应用提供了良好的基础。