重组干扰素-α是一种具有抗病毒、免疫调节、抑制细胞增殖等生物活性的细胞因子，临床上用于治疗病毒性疾病和癌症。由于干扰素在体内的循环半衰期短，因此为维持有效的血药浓度需要每天或一周三次对病人进行给药。聚乙二醇化学修饰可以有效的改善干扰素的物理化学性质和生物学特性，延长体内循环半衰期。本文中制备的重组人干扰素-α2b是利用基因重组技术在蛋白质的氨基酸序列中引入了游离的半胱氨酸，随后应用马来酰亚胺PEG修饰剂对引入的游离巯基进行位点特异性修饰，从而得到了结构单一的单PEG化干扰素蛋白。重组人干扰素-α2b在大肠杆菌中以不溶性包涵体的形式表达。实验对比优化了包涵体蛋白的洗涤和体外变性、复性的条件，以提高蛋白产率和纯度。同时，对重组人干扰素-α2b的PEG化修饰反应条件进行了优化，分别对还原剂、反应体系pH、反应温度、反应时间、蛋白浓度等条件进行了优化。通过这些反应条件的优化，提高单PEG化重组人干扰素-α2b蛋白的产率。目前，用于分离纯化PEG化蛋白的色谱方法多为离子交换层析和凝胶过滤层析。PEG分子共价键合到蛋白质分子上时会覆盖蛋白质分子表面的部分电荷，使其带电荷量减少。实验中利用这种电荷量的差异，使用阳离子交换层析对重组人干扰素-α2b的PEG化反应产物进行了初步的分离纯化研究。