青翘药材质量评价及影响因素研究

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研究目的:中药连翘是木犀科植物连翘Forsythia suspensa(Thunb.)Vahl的干燥果实,是抗击疫病要药之一,临床疗效好。青翘作为主要流通品种,市场需求量逐年提高,由此促发产地大面积扩种,推动了产业的发展。2020版《中华人民共和国药典》公布了连翘新的标准,但还存在当前市场及产地青翘质量情况不明朗,质量评价方法相对单一,质量等级划分不完善,质量影响因素复杂,质量控制规范缺失等问题。因此,本文以青翘为研究对象,引入层次分析法与主成分分析构成的综合赋权法(AHP-PCA)以及中药质量常数综合评价方法,分析青翘的质量指标现状和差异,为青翘质量的等级划分及规范化生产、流通提供参考。应用地理信息技术处理软件ArcGIS和最大熵值模型MaxEnt,预测青翘的适宜产区和环境变量主要限制因子,为青翘质量区划提供基础。通过比较不同采收期的青翘指标成分差异确定合理的采收时间,应用正交试验设计研究加工工艺对青翘质量的影响,为青翘的规范加工提供详细参数,同时为构建青翘的系统性质量控制体系提供依据。研究方法:(1)按2020年版《中国药典》相关方法检测青翘药材中杂质、水分、醇溶性浸出物、挥发油、连翘苷、连翘酯苷A等质量指标的含量,测定其性状指标。构建主客观赋权和中药质量常数综合评价方法,明确青翘的质量现状,并对青翘进行综合质量评价。(2)通过建立气象、海拔、地理等数据库,应用ArcGIS10.8、最大熵值模型MaxEnt、相关性分析和逐步回归分析等对青翘适宜性产区进行区划,筛选出可能影响连翘分布的环境因子,依据MaxEnt运算结果和ArcMAP绘制青翘的适宜产区和质量区划。(3)按2020年版《中国药典》相关方法测定不同时期的青翘药材中挥发油、连翘苷、连翘酯苷A的含量和性状指标,分析各采收期指标的差异和变化规律,确定青翘合理的采收期。(4)采用正交试验设计方法,对同一时期采收的青翘进行加工正交试验设计,并按2020年版《中国药典》相关方法测定不同加工处理的青翘药材中挥发油、连翘苷、连翘酯苷A的含量,再分别以挥发油、连翘苷、连翘酯苷A以及这三个指标的综合得分作为考察指标,分析杀青烘干、杀青晒干、阴干等不同加工方式对指标的影响,确定单个指标及综合加工较优的方法。结果与结论:(1)青翘的质量整体良好,可划分为三个等级。青翘中杂质、水分、醇溶性浸出物、挥发油、连翘苷、连翘酯苷A的含量范围分别为0~7.80%、1.60%~8.18%、13.13%~61.60%、0.21%~3.47%、0.02%~2.15%、0.79%~14.04%。百分质量常数≥ 76.53%,质量常数≥ 4.25的样品划为一等品,百分质量常数≥ 64.19%且≤74.24%,质量常数≥ 3.57的样品划为二等品,百分质量常数≥ 46.27%且≤ 61.95%,质量常数≥ 2.57的样品划为三等品。一等品青翘的挥发油含量≥ 2.40%,连翘苷含量≥0.59%,连翘酯苷A含量≥8.34%,醇溶性浸出物含量≥ 38.66%,水分含量≤ 4.99%;二等品青翘上述指标的含量分别≥ 2.26%,≥ 0.41%,≥ 7.47%,≥ 32.58%,≤ 5.33%;三等品青翘上述指标的含量分别≥ 2.15%,≥ 0.32%,≥4.60%,≥ 31.52%,≤7.23%。(2)影响连翘分布的环境因子,分别是最冷月份最低温度、平均气温日较差、等温性、年降水量、海拔和最湿月份降水量;温度因子的贡献率(73.1%)大于降水因子的贡献率(22.7%)。挥发油含量可能与年降水量有关,连翘苷含量可能与最冷月份最低温度有关,连翘酯苷A含量可能与最冷月份最低温度和海拔有关。(3)应以挥发油的含量作为青翘采收的首要限制因素,其次是连翘苷和连翘酯苷A的含量,而形态指标上也应满足药典要求,山西省临汾市安泽县的青翘适宜的采收期为7月下旬至8月下旬,最佳采收期为8月上旬和中旬。(4)杀青对挥发油和连翘酯苷A含量影响较大,不杀青或者短时间杀青的样品挥发油含量较高,但连翘酯苷A含量较低。若以综合质量得分为考察指标,则可采用汽蒸杀青10 min,40℃烘干48h。综上,本课题对青翘质量评价和质量因素进行了系统性研究,明确了青翘的质量现状并首次引入中药质量常数对青翘进行了客观科学的质量评价和等级划分。探究影响青翘质量的环境因子,为确定青翘的优质产区奠定了一定基础。确定采收期和不同加工方式对青翘不同指标的影响,为进一步完善青翘的质量控制体系研究提供了理论基础。
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