论文部分内容阅读
目的:本实验室前期研究表明，p55PIK能与细胞增殖核抗原（PCNA）直接结合，导致PCNA与DNA聚合酶结合增多，从而促进细胞DNA合成和细胞增殖。本研究拟探讨TGF-β1对p55PIK表达的影响及其机制，初步阐明TGF-β1可以通过调控p55PIK的表达来抑制肺癌细胞的增殖。方法:用TGF-β1处理肺腺癌细胞PC-9，观察其对p55PIK mRNA和蛋白表达水平的影响。利用双荧光素酶报告基因系统，观察TGF-β1对p55PIK启动子活性的影响。通过RNA干扰技术初步阐明TGF-β1调控p55PIK的下游信号通路。运用Brdu掺入法检测TGF-β1及p55PIK对肺癌PC-9细胞DNA合成的影响，并观察高表达p55PIK能否削弱TGF-β1对PC-9细胞DNA合成的抑制作用。结果:在肺癌细胞PC-9中，TGF-β1能分别在mRNA和蛋白水平抑制p55PIK的表达。同时，TGF-β1能抑制p55PIK启动子活性。TGF-β1可以通过下游Smad分子介导的信号通路抑制p55PIK表达。TGF-β1抑制PC-9细胞的增殖，高表达或低表达p55PIK则分别促进或抑制细胞增殖，在TGF-β1处理的PC-9细胞中高表达p55PIK能部分逆转TGF-β1的增殖抑制效应。结论：TGF-β1能通过下游的Smad信号通路抑制p55PIK启动子活性，下调p55PIK的mRNA和蛋白表达水平，从而抑制肺癌PC-9细胞的增殖。