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研究目的通过观察骨骼肌细胞中IL-6(白介素-6)在运动性慢性骨骼肌组织损伤中的表达,对比不同给药下骨骼肌细胞中IL-6表达的变化,并结合骨骼肌细胞病理组织形态的改变,来分析骨骼肌细胞中IL-6在运动性慢性肌组织损伤中的表达特点以及外用伤科药对运动性骨骼肌慢性损伤中肌细胞IL-6表达的影响,探讨骨骼肌细胞中IL-6在运动性慢性肌组织损伤修复中所发挥的作用。研究方法本研究采用体重在2.2.kg-2.5kg成年雄性新西兰兔作为实验对象,随机分为空白对照组(0W)和实验组:空白对照组5只;实验组分别分为实验2周组(2W)、实验3周组(3W)、实验4周组(4W)、实验5组周(5W),其中,实验2周组5只作为造模组;实验3周组(n=28)分为:3W消痛贴组(n=7)、3W扶他林组(n=7)、3W安慰剂组(n=7)和3W训练对照组(n=7);实验4周(n=28)组分为:4W消痛贴组(n=7)、4W扶他林组(n=7)、4W安慰剂组(n=7)和4W训练对照组(n=7);实验5周(n=27)分为:5W消痛贴组(n=7)、5W扶他林组(n=6)、5W安慰剂组(n=7)和5W训练对照组(n=7)。实验组动物采用高电压低电流刺激仪刺激,使其产生主动的跑跳运动,训练方案:0.1-0.2s/次(每两次间隔12s),20min/组(两组间歇20min),3组/天,5天/周。训练结束后分别给(3W、4W、5W)扶他林组、消痛贴组、安慰剂组以不同的外用药。空白对照组在笼内标准饲养;实验组各组在相应的训练周(2、3、4、5)完成后取左腿腓肠肌内侧头,用4%多聚甲醛固定液保存,进行常规HE染色和免疫组化处理,采用奥林巴斯数码光学显微镜观察对比各组肌组织形态学变化,对免疫组化图像进行拍照,采用D3.2图像软件处理免疫组化图片,计算肌细胞中IL-6表达的平均光密度值,所得数据PASWstatistics18.0软件对所得数据进行处理,对肌细胞IL-6进行半定量分析。研究结果1.HE染色观察:空白对照组肌细胞排列整齐、紧凑,大小不均,外形呈多边形或似原形;细胞质染色均匀;未见明显的炎性细胞浸润,无肌纤维变性、无血管淤血、增生、无结缔组织增生等情况现象。2W训练对照组出现炎性细胞浸润灶,细胞核肿胀,细胞间隙开始变得模糊不清,细胞肿胀呈圆形,炎性细胞较多在细胞间,细胞坏死发生空泡样改变,炎性细胞侵入坏死细胞内;3、4周组炎性细胞浸润灶、坏死细胞增多,出现细胞核固缩;5周组炎性细胞浸润灶、坏死细胞相对较3、4周组少。横向看,与其它各组比,外用贴药组炎性细胞浸润、细胞坏死程度相对较轻;2.免疫组化观察:空白对照组:有少量IL-6的表达;2W训练组IL-6表达较多,多呈弥漫状分布于细胞质;其余各组均有不同程度的表达。3W训练组IL-6的平均光密度值最高,其它各组显著低于2W训练组(P<0.01);3周组和4周组IL-6平均观密度值无明显差异,基本上与空白对照组相持平;与4W消痛贴组、4W扶他林组相比较,5W消痛贴组、5W扶他林组IL-6的平均光密度值显著提高(p<0.05);与4W训练对照组、4W安慰剂组、5W安慰剂组比较,5W训练对照组、5W安慰剂组IL-6平均光密度值无显著性差异。研究结论1.运动性骨骼肌慢性损伤可诱导骨骼肌细胞产生IL-6,在训练强度、方式不变的前提下,肌细胞IL-6的表达逐渐对损伤产生适应性,随着训练时间的延长,训练3周后肌细胞IL-6回落到训练前的水平,并会延续1周,到第五周时开始出现第二次升高趋势。2.在运动性骨骼肌慢性损伤中,消痛贴外用对运动性骨骼肌慢性损伤有着较为明显的疗效,但与肌细胞IL-6表达的变化关系不大,提示外用消痛贴可能是通过其他途径影响着肌组织损伤的修复过程,或者可以考虑增加药量、运动量做进一步的研究。