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1.84只1日龄小公鸡,随机分为对照组、新城疫弱毒疫苗免疫组(ND组)、饲喂半胱胺的试验组(CS组)以及饲喂半胱胺后,再用新城疫弱毒疫苗进行消化道粘膜的试验组(CN组)。在8日龄时进行首次免疫,分别于首免后第21、35及49天时宰杀,采取十二指肠和空肠,研究了小肠粘膜中生长抑素(SS)阳性细胞、IgA阳性细胞、T淋巴细胞及肥大细胞的分布及其数量的变化。 采用亲和免疫组织化学技术(ABC法)研究了鸡小肠中SS阳性细胞的分布及数量变化。结果显示:SS阳性细胞主要分布于小肠上皮细胞之间及固有膜肠腺周围。应用新城疫疫苗首免后第三周,新城疫免疫组十二指肠中SS阳性细胞数量比对照组极显著增加(P<0.01)。首免后第五周,新城疫免疫组空肠中SS阳性细胞数量比对照组显著增加(P<0.05);半胱胺组十二指肠、空肠中SS阳性细胞数量比对照组极显著减少(P<0.01);饲喂半胱胺后,再用新城疫疫苗免疫的试验组中,十二指肠中SS阳性细胞数量比对照组极显著减少(P<0.01);空肠中SS阳性细胞比对照组显著减少(P<0.05)。提示粘膜免疫后淋巴细胞产生的细胞因子可以刺激SS阳性细胞的产生,表明粘膜免疫可对神经内分泌产生一定影响。 应用免疫组织化学技术(SPA-HRP间接法)、酸性非特异性酯酶(ANAE)染色技术分别研究了鸡小肠粘膜中IgA阳性细胞、T淋巴细胞数量的变化。结果表明:新城疫疫苗首免后第三周,CN组十二指肠中IgA阳性细胞数量比ND组极显著增加(P<0.01);CN组空肠中IgA阳性细胞数量比对照组、ND组、CS组均极显著增加(P<0.01);首免后第五周,CN组十二指肠中IgA阳性细胞数量比ND组极显著增加(P<0.01);空肠中IgA阳性细胞数量比对照组极显著增加(P<0.01);至首免后第七周,十二指肠中AENE阳性细胞数量比对照组极显著增加(P<0.01);各试验组十二指肠、空肠中IgA阳性细胞数量较接近。结果提示,应用半胱胺降低体内生长抑素水平后,再用新城疫疫苗对鸡进行消化道粘膜免疫,可以有效地增加小肠中IgA阳性细胞、ANAE阳性细胞的数量,提高机体的粘膜免疫力。 应用甲苯胺蓝染色技术研究了鸡小肠中肥大细胞数量的变化。结果显示:新城疫疫苗首免后第三周。CN组十二指肠中肥大细胞数量比ND组明显增加(P<0.01);首免后第五周,各试验组十二指肠中肥大细胞的数量均比对照组多,尤其是CN组,可能因为个体差异较大,各组间并无显著差异。本试验的结果提示,肥大细胞的数量可能反映了消化道粘膜的免疫水平。自目片趁:举月免月睡对碑小肠月匕长抑食妇月七和枯思免庆的影响2.在灌喂两种剂量半肤胺的基础上应用新城疫弱毒疫苗对鸡进行消化道粘膜免疫,采用放射性免疫分析的方法测定了鸡十二指肠和脾脏中IL一2的含量,结果表明:应用半耽胺首免后第三周,半肤胺I组(20蹭/矢召.)十二指肠和脾脏中IL一2的含量比仅用新城疫弱毒疫苗免疫组显著增加(只0.05);半肤胺H组(80理酬磅)十二指肠中IL一2含量比仅用新城疫弱毒疫苗免疫组极显著增加(代0.01);首免后第四周,脾脏中,半胧胺I组IL一2含量比仅用新城疫弱毒疫苗免疫组显著增加(只0.05);十二指肠中,半脱胺H组IL一2含童比仅用新城疫弱毒苗免疫组显著增加(只0.05)。由此可见,SS可以抑制IL--2的释放,半肤胺通过耗竭或中和SS,可以提高十二指肠粘膜和脾脏中IL一2的含量,增强机体的粘膜免疫力。 采用双夹心ELIsA检测了鸡血液中Igh的含量,结果表明:结果表明首免后第三周和第四周两种剂量半肤胺组的血液中IgA含量与新城疫免疫组的相比分别呈极显著增加(P<0.01)和显著增加(尸<0.05):提示血液中IgA含量受SS影响较大,饲喂半脱胺降低SS水平后,应用新城疫弱毒疫苗进行消化道粘膜免疫,可以提高血液中IgA的含量,增强机体的系统免疫力。3.首次应用亲和免疫组化方法(ABC法)和免疫组化间接法(SPA一HRP间接法)同时显示了sS阳性细胞和Igh阳性细胞的在十二指肠中的分布情况。结果显示:SS阳性细胞主要分布于小肠绒毛上皮细胞之间、肠腺上皮细胞间及肠腺周围。Igh阳性细胞主要分布于小肠固有层中.在ss阳性细胞分布较多的部位,Igh阳性细胞的分布则较少;而在IgA阳性细胞分布较多的部位,ss阳性细胞则分布较少。提示SS对IgA细胞的合成有重要影响。因此,通过半肤胺降低体内sS的水平来增加IgA阳性细胞的数t是一条行之有效的途径。