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辅酶B12,即5′—脱氧腺苷钴胺素,是具有生物活性的有机金属化合物。在生物体内,辅酶B12为某些酶的辅因子,催化分子内重排反应的进行。目前对该类反应机理中的某些步骤缺乏充分的证据。辅酶B12模型物的研究对阐明辅酶B12的作用机理有重要意义,至今已合成3000余种,但结构上与辅酶B12类似的含脱氧核苷的模型物(或类似物)数量并不多,其中含2′-脱氧核苷轴向配体的钴胺素仅有两例:2′,5′-二脱氧腺苷钴胺素和5′-脱氧胸苷钴胺素,但缺乏各种性质研究。本论文选择2′,5′-二脱氧核苷钴胺素作为研究重点,合成若干类似物,并进行了Co-C键稳定性及其影响因素的研究,特别是定量测定其Co-C键离解能对于阐明辅酶B12参加的分子内重排反应机制有重要意义。 本工作合成了11个对甲苯磺酰化脱氧核苷配体。其中4个为首次报导,即5-澳-5’-O-对甲苯磺酰基-2′-脱氧胞苷,5′-O-对甲苯磺酰基-2′,3′-二脱氢-2′,3′-二脱氧腺苷,5′-O-对甲苯磺酰基-2′,3′-二脱氢-2′,3′-二脱氧尿苷,5′-O-对甲苯磺酰基-2′,3′-二脱氧尿苷。对所有配体进行了UV及1HNMR表征,部分进行了元素分析及MS表征。 合成了11个配合物,其中有6个钴胺素,除甲基钴胺素与辅酶B12外,另4个为2′,5′-二脱氧核苷钴胺素,即2′,5′-二脱氧胞苷钴胺素,2′,5′-二脱氧尿苷钴胺素,2′,5′-二脱氧腺苷钴胺素,5′-脱氧胸苷钴胺素,其中前两个为首次报导。为了与六配位钴胺素进行比较,用Ce(OH)3还原打断5,6-二甲基苯并咪唑核苷酸得到了5个相应的五配位的钴啉醇酰胺,即2′,5′-二脱氧胞苷钴啉醇酰胺,2′,5′-二脱氧尿苷钴啉醇酰胺,2′,5′-二脱氧腺苷钴啉醇酰胺,5′-脱氧胸苷钴啉醇酰胺,5′-脱氧腺苷钴啉醇酰胺,前4个为首次报导。 对以上配合物用UV-vis谱进行了表征.并首次用一维、二维(COSY、Relay-COSY、J-Resolved谱、TOCSY及NOESY等方法)1HNMR进行了1H归属、偶合常数求解及空间结构的研究。尤其对5′-脱氧腺苷钴啉醇酰胺进行了较全面研究,归属了其65个非交换质子中的61个,并与辅酶B12的base-on、base-off形式的归属及结构进行了比较。 首次用ESR对四个2′,5′-二脱氧核苷钴胺素避氧光解产生的2′,5′-二脱氧核苷自由基及B12r给以证明。用tNB做自由基捕获剂产生的自旋加合物,其ESR谱呈1:1:1:1四重峰,对此四重裂分以及温度变化对谱线宽度的影响进行了解释。 对四个2′,5′-二脱氧核苷钴胺素水溶液中存在的质子化base-off≒未质子化base-off≒base-on物种平衡及热力学性质进行了研究,首次测定了平衡常数pKa=2.9~3.5;pH=6.9时base-on形式的含量占~95%以及base-on至未质子化base-off形式转化的△H≈7kcal mol-1,△S=17-18calK-1mol-1。 首次摸索出四个2′,5′-二脱氧核苷钴胺素光解及热解机理随pH变化的规律性;对体现Co-C异裂的氰分解、酸分解动力学进行了研究并鉴定了产物;