目的肺癌已成为世界上最严重、死亡率最高的恶性肿瘤。非小细胞肺癌(NSCLC)约占到所有肺癌的80%,手术治疗后的5年生存率非常低,预后极差。因此,寻找一种更有效、提高预后生存率的方法来治疗这种恶性肿瘤变得更为迫切。本课题中,是第一次对黄花夹竹桃甙——这个从传统中药黄花夹竹桃中分离出来的中药单体,其抑制非小细胞肺癌细胞生长的作用进行研究,并确定了其潜在的抗肿瘤机制。方法体外实验:将培养中的对数生长期的非小细胞肺癌A549和H460细胞株,用MTT法检测黄花夹竹桃甙对非小细胞肺癌细胞株增殖的影响;克隆形成实验检测黄花夹竹桃甙对非小细胞肺癌细胞集落形成的影响;Annexin V/PI(Propidium Iodide)双染色和Hoechst 33342染色检测黄花夹竹桃甙对非小细胞肺癌细胞凋亡的影响;采用流式细胞术,检定黄花夹竹桃甙对非小细胞肺癌细胞周期的影响;蛋白印迹(Western Blot)法检测凋亡相关通路中各蛋白水平的变化。体内实验,将培养中的对数生长期的A549细胞皮下植入裸鼠中,观察荷瘤小鼠的肿瘤生长情况。结果MTT实验表明,黄花夹竹桃甙可以有效抑制非小细胞肺癌A549和H460细胞的增殖,且具有剂量和时间依赖性。克隆形成实验结果表明,随着黄花夹竹桃甙的浓度增加,对A549和H460细胞的克隆形成能力有较强的抑制作用。Annexin V/PI双染色和Hoechst 33342染色结果显示,黄花夹竹桃甙可诱导非小细胞肺癌细胞发生早期凋亡或晚期凋亡,A549细胞存活细胞数从97.7%减少到49.5%,早期凋亡细胞数从1.34%增加到24.7%;H460细胞中,随着黄花夹竹桃甙的浓度增加,存活细胞数从94.4%减少到74.9%,晚期凋亡细胞从2.73%增加到13.3%。细胞周期分析显示,黄花夹竹桃甙诱导非小细胞肺癌细胞S期阻滞。此外,Western Blot分析表明经黄花夹竹桃甙处理的非小细胞肺癌细胞,上调了Bad、cleaved-caspase-3,与cleaved-PARP的表达;下调了SRC、p-AKT和Bcl-xl的表达,并且呈剂量依赖性。最后,对荷瘤裸鼠的肿瘤生长观察表明,黄花夹竹桃甙和地高辛对肿瘤均具有较好的抑制作用(P<0.05),但黄花夹竹桃甙对非小细胞肺癌肿瘤生长的抑制作用更强(P<0.01)。结论结果表明,黄花夹竹桃甙抑制非小细胞肺癌细胞的增殖,通过调控凋亡相关蛋白表达,从而诱导非小细胞肺癌细胞凋亡,并将A549和H460细胞株的细胞周期阻滞在S期。所以黄花夹竹桃甙可能是一种有希望的治疗非小细胞肺癌的药物。