对2型糖尿病大鼠模型血清胰岛素水平及胰腺β细胞mRNA表达的研究

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近年来,糖尿病已经成为危害我国乃至全世界人类健康的重要疾病之一。世界范围内约有1.7亿患者,其中2型糖尿病(T2DM)占90%以上[1]。目前,中国已取代印度,成为全球糖尿病第一大国。而且,中国糖尿病高危人群也在扩大,约有1.5亿。虽然经过及时有效的治疗可以严格控制血糖,延缓和(或)防止糖尿病各种并发症的发生,提高患者生存率,但是这毕竟给患者带来经济及精神上的压力。因此,寻求有效、合理的预防措施以减少糖尿病的发病率具有重要意义。不同种属动物的T2DM模型已被证实早期有不同程度的胰岛素水平升高。但是对于胰岛素水平的较远期研究较少,本实验预对此问题进行研究。目的:观察T2DM大鼠模型胰岛素水平的变化。方法:80只健康雄性Sprague Dawley(SD)大鼠(购于河北医科大学动物实验中心)随机分为4组,每组20只。Ⅰ组高糖高脂组:高糖高脂饲料喂养。Ⅱ组实验组:高糖高脂饲料喂养6周,腹腔注射Streptozocin(STZ)(30mg/Kg)。Ⅲ组普通饲料组:普通饲料喂养。Ⅳ组普通饲料+STZ组:普通饲料喂养6周,腹腔注射STZ(30mg/Kg)。本实验采用高糖高脂饲料喂养SD大鼠,6周后腹腔注射STZ30mg/Kg,以72小时血糖≥11.1mmol/L,并持续7天,同时出现多饮、多食、多尿症状为模型制备成功。采用怡成血糖仪检测血糖,采用大鼠胰岛素ELISA检测试剂盒测定血清胰岛素含量,RT-PCR测定胰腺β细胞mRNA表达水平。分别于造模前(0天)、造模后3天、4周、8周、12周、16周、18周、28周测定血清胰岛素含量及胰腺β细胞mRNA表达水平。结果:1血糖0天时Ⅰ、Ⅱ组血糖较Ⅲ、Ⅳ组高,但各组间无显著性差异(P>0.05);Ⅱ组3天时(16.7±2.6)血糖显著升高,较0天(6.8±0.5)时有统计学差异(P=0.001<0.05),以后各时间点仍维持在较高水平,但它们之间无差异;Ⅰ、Ⅲ组各时间点均无差异(P>0.05);Ⅳ组3天时血糖显著升高,较0天时有统计学差异(P=0.001<0.05),4周及以后各时间点均处于较低水平,与0天比无统计学差异(P>0.05)。2血清胰岛素含量(ELISA法)Ⅰ组血清胰岛素水平各时间点间均无统计学差异(P>0.05);与Ⅱ组相比,同时间点胰岛素水平较低,但均无统计学差异(P>0.05);与Ⅲ组相比,0天时较高,有统计学差异(P=0.001<0.05),其余各同时间点胰岛素水平较高,但均无统计学差异(P>0.05);与Ⅳ组相比,0天时较高,有统计学差异(P=0.044<0.05),其余各同时间点胰岛素水平较高,但均无统计学差异(P>0.05)。Ⅱ组血清胰岛素水平3天时(30.393±2.038)开始升高,但与0天无统计学差异(P>0.05),4周时(31.321±2.467)升高明显,与0天、3天时有差异(P<0.05),4周、8周、12周、16周、18周血清胰岛素处于较高水平,无显著性差异(P>0.05),但呈现先上升后下降的趋势,12周时(37.071±5.537)处于最高水平,28周时(30.854±3.420)血清胰岛素水平降低,与4周、8周、12周、16周、18周有差异(P<0.05),但与0天、3天无差异(P>0.05);与Ⅲ组相比,0天时较高,有统计学差异(P=0.001<0.05),其余各同时间点胰岛素水平较高,但均无统计学差异(P>0.05);与Ⅳ组相比,0天时较高,有统计学差异(P=0.024<0.05),其余各同时间点胰岛素水平较高,但均无统计学差异(P>0.05)。Ⅲ组血清胰岛素水平无明显变化,各个时期均无统计学差异(P>0.05);与Ⅳ组相比,同时间点胰岛素水平较高,但均无统计学差异(P>0.05)。Ⅳ组血清胰岛素水平随时间的推移呈现下降的趋势,但各时间点之间无统计学差异(P>0.05)。3胰腺β细胞mRNA表达水平Ⅰ组胰腺β细胞mRNA表达水平无明显变化,各时间点间均无统计学差异(P>0.05);与Ⅱ组相比,同时间点β细胞mRNA表达水平较低,但均无统计学差异(P>0.05);与Ⅲ组相比,0天时较高,有统计学差异(P=0.015<0.05),其余各同时间点β细胞mRNA表达水平较高,但均无统计学差异(P>0.05);与Ⅳ组相比,0天时较高,有统计学差异(P=0.026<0.05),其余各同时间点β细胞mRNA表达水平较高,但均无统计学差异(P>0.05)。Ⅱ组β细胞mRNA表达水平3天时开始升高,但与0天无统计学差异(P>0.05),4周时升高明显,与0天、3天时有差异(P<0.05),4周、8周、12周、16周、18周β细胞mRNA表达处于较高水平,无显著性差异(P>0.05),但呈现先上升后下降的趋势,12周时处于最高水平,28周时β细胞mRNA表达水平降低,与4周、8周、12周、16周、18周有差异(P<0.05),但与0天、3天无差异(P>0.05);与Ⅲ组相比,0天时较高,有统计学差异(P=0.002<0.05),其余各同时间点β细胞mRNA表达水平较高,但均无统计学差异(P>0.05);与Ⅳ组相比,0天时较高,有统计学差异(P=0.001<0.05),其余各同时间点β细胞mRNA表达水平较高,但均无统计学差异(P>0.05)。Ⅲ组β细胞mRNA表达水平无明显变化,各个时期均无统计学差异(P>0.05);与Ⅳ组相比,同时间点β细胞mRNA表达水平较高,但均无统计学差异(P>0.05)。Ⅳ组β细胞mRNA表达水平随时间的推移呈现下降的趋势,但各时间点之间无统计学差异(P>0.05)。结论:本实验发现,2型糖尿病大鼠模型28周前存在高胰岛素血症,且可能部分与胰岛细胞增殖有关。
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