论文部分内容阅读
目的 类风湿关节炎(rheumatoid arthritis, RA)是一种以滑膜组织炎性细胞浸润、滑膜组织增生、关节软骨及软骨下骨破坏为特征的全身性自身免疫性病。病因和发病机制尚不清楚。目前认为RA是由于不明抗原介导的免疫反应启动,诱导外周血淋巴细胞活化,炎症细胞向滑膜浸润并产生大量炎症介质及自身抗体,以非化脓性增生性滑膜炎为主要病理特点,进而产生一系列关节破坏改变的过程。核因子-κB(nuclear factor-kappaB, NF-κB)是参与细胞内信号传导的重要转录因子,其主要生物学功能是调控众多基因特别是免疫炎症相关基因的转录。近年研究表明NF-κB在RA中活化表达,参与了RA发病的多个环节。抑制NF-κB活性可能成为治疗RA新的途径。NF-κB的反义寡核苷酸(antisense oligodeoxynucleotides, ASODN)用于抑制核因子-κB活性受到关注。本研究旨在观察RA患者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell, PBMC)趋化情况,以及NF-κB ASODN对RA患者PBMC趋化功能的影响,为探索RA发病机制及评价NF-κB ASODN治疗RA作用提供实验依据。方法 随机选择活动期RA患者,共30例,诊断均符合美国风湿病学院1987年RA的诊断标准,3个月未经免疫抑制剂治疗。健康献血者10例为对照组,与RA组患者相比无性别及年龄差异。常规分离PBMC,比较RA病人及正常人PBMC迁移距离。趋化因素分为空白对照、IL-2、<WP=5>RA关节液、RA滑膜细胞培养液组,采用体外趋化模型,观察RA患者PBMC对上述各趋化因素距离及RA患者PBMC转染 NF-κB ASODN 前后对趋化距离的影响,同时分别以地塞米松和NF-κB错义寡核苷酸(Missense oligodeoxynucleotides, MSODN)为阳性和阴性对照。结果 1.与正常人对照组比较,RA患者PBMC自然迁移能力显著增强。P<0.05;2.与空白对照组比较,RA患者PBMC对IL-2、RA关节液、RA滑膜细胞培养液等趋化因素趋化距离有明显增高。P<0.05;3.与非转染组及NF-κB MSODN转染比较,NF-κB ASODN转染后RA患者PBMC趋化迁移能力明显受到抑制。P<0.05;4.与非转染组比较,NF-κB ASODN转染后和地塞米松处理后的RA患者PBMC趋化迁移能力减弱。P<0.05;5.NF-κB ASODN转染后,RA患者PBMC对RA患者关节液趋化能力的抑制呈时间依赖性。结论 1.正常人PBMC存在一定的自然迁移能力,RA患者PBMC迁移能力较正常人PBMC迁移能力增强。2.RA患者PBMC对IL-2、RA关节液、RA滑膜细胞培养液趋化因素均有趋化作用。3.转染NF-κB的ASODN后的RA患者PBMC对IL-2、RA关节液、RA滑膜细胞培养液趋化因素诱发趋化能力均有抑制作用,并且呈时间依赖性,随作用时间延长,抑制能力增加。