中华绒鳌蟹(Eriocheir sinensis)眼柄神经多肽激素编码基因的克隆和表达研究

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甲壳动物眼柄X器官一窦腺复合体(X-Organ and Sinus Gland coraplex,XO&SG)类似于哺乳动物的下丘脑.垂体系统,是甲壳动物重要的神经内分泌器官。它合成和分泌甲壳动物高血糖激素(CHH)、蜕皮抑制激素(MIH)、性腺抑制激素(GIH)、大额器官抑制激素(MOIH)及色素聚集激素(PCH)和色素分散激素(PDH)等多种神经肽类激素,如同开关一样调控甲壳动物的性腺发育、蜕皮、能量代谢和渗透压调节等重要生理功能。因此,对这一系统的研究一直是甲壳动物内分泌学的重点内容。对这一系统的研究将有助于在生产上实现人工控制甲壳动物的繁殖和生长。中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)俗称河蟹,是我国重要的经济甲壳动物之一,近年来在养殖群体中出现了性早熟,以及无法完成蜕皮活动在蜕皮过程中死亡的现象。这给河蟹养殖者和养殖业带来了很大的损失。从目前已经获得的结论和成果上看,有关甲壳动物神经内分泌学的研究成果最受专业科技人士的重视,也最有可能从根本上解决这一难题。 本研究以河蟹眼柄窦腺为RNA抽出材料,根据本实验室分离纯化并经过功能鉴定的神经多肽激素的氨基酸序列测定结果,构建简并DNA引物,采用RT-PCR方法并结合3’RACE和5’RACE方法,进行了编码基因的克隆和序列分析。根据克隆获得cDNA序列构建DIG标记的基因特异探针应用Northem Blot方法对处于蜕皮间期二龄河蟹的多个组织中MIH的表达情况进行探索。
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