含富血小板血浆的纳米纤维支架对软骨缺损的修复作用

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目的富血小板血浆(platelet-rich plasma,PRP)含有丰富的生长因子,对多种组织具有再生和修复作用。通过构建含PRP的纳米纤维支架,实现生长因子的缓释效果,并研究其对软骨再生的作用。方法通过乳液电纺的方法构建含PRP的纳米纤维支架和PCL/GE支架,并对支架进行力学、亲水性、降解性等表征。通过ELISA法测定生长因子的缓释曲线。将两种支架体外分别与BMSC共培养,通过SEM、CCK-8、免疫荧光、qPCR和Westernblot等方法研究支架对细胞的增殖、分化的影响。体内将支架植入兔膝关节软骨缺损区,并通过组织学、Micro-CT和IL-1β浓度检测的方法对其修复软骨缺损的效果进行评价。结果PRP加入之后,使PCL/GE纳米纤维支架的力学参数与软骨组织更为接近,同时具有良好的亲水性和缓释效果,三种生长因子的缓释时间达到一个月左右。体外实验中,细胞在含PRP支架上能良好生长及增殖,且含PRP的支架在体外能对BMSC产生显著的趋化效应。通过免疫荧光法、qPCR、Western blot等方法,验证了含PRP支架可以有效促进BMSC的体外成软骨诱导分化和软骨标志物的表达,II型胶原、aggrecan、Sox9的合成均被上调;I型胶原的表达下降。缺损区植入含PRP支架的关节,软骨细胞有明显再生,且软骨细胞周围可见软骨基质合成增加。结论1.通过乳液电纺的方法能够得到结构稳定均一的含PRP纳米纤维支架,其特点为亲水性好,力学参数与软骨组织接近;支架中生长因子的缓释期近一个月。2.与PCL/GE支架相比,含PRP的纳米纤维支架可以促进细胞的粘附、增殖、趋化,并可以促进干细胞的成软骨分化和软骨标志物的表达。3.含PRP纳米纤维支架能够在体内有效促进软骨缺损的修复。其效果接近于正常软骨组织。这可能与纳米纤维支架自身的三维结构,以及PRP中的多种生长因子有关。
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