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失眠是一种睡眠障碍,对人体机能、智力以及免疫力有巨大危害。在临床上常用具有镇静催眠作用的化学合成药物,如苯二氮卓类(BDZ)和巴比妥类催眠药物进行治疗,但这些药物因具有副作用及成瘾性使其应用受到限制。中医药具有良好安神镇静作用,而且不良反应少,具有广阔的应用前景。酸枣仁是一种用于治疗睡眠病症的常用中药,具有补中益气,镇静安神的功效。已有前人对酸枣仁中的黄酮、皂苷、油脂和生物碱等分别进行催眠活性的研究。但各研究结果之间存在一些差异。基于此,本文对酸枣仁进行了提取分离、催眠活性测试等一系列的研究。
本文结合前人研究方法,设计了一条新的、不引入具有明显毒性试剂和用品的、相对安全的提取路线,采用醇提法、正丁醇萃取法、醇沉法分别从同一批酸枣仁样品中依次提取出了皂苷、黄酮和多糖样品。经初步纯化,并经化学法和紫外定性检测,证明各样品中不含有可能影响后续催眠活性试验的其他杂质后,进行小鼠催眠活性实验。通过对小鼠的自发活动(走动时间和双上肢抬举次数)和协调运动试验,巴比妥钠试验(阈上剂量巴比妥钠所致小鼠睡眠时间、阈下剂量巴比妥钠所致小鼠睡眠只数的改变),测试了多糖、皂苷和黄酮三种粗提样品的催眠活性强弱。结果显示,催眠活性从强到弱的顺序是:皂苷)黄酮)多糖,多糖不具有催眠活性,均属首次报道。由于皂苷的活性最强,下一步再对皂苷做进一步的研究。
采用柱层析、薄层层析法从粗皂苷样品中分离出了两种组分样品Ⅰ、Ⅱ。通过HPLC-ELSD初步检测发现,该两种样品在检测范围内是具有较高纯度的单一化合物。因此下一步实验直接用这两种样品的水溶液做动物活性实验。采用以上相同的自发活动和协调运动试验,巴比妥钠试验,分别测试两种样品对小鼠的安神催眠活性。结果发现,催眠活性从大到小的顺序是:样品Ⅰ)样品Ⅱ。
本实验对两种样品进行了紫外一可见光吸收光谱、红外吸收光谱、核磁共振<1>H谱和<13>C谱、气相色谱一质谱联用等仪器分析,但由于数据和资料的不足尚不能推导出这两种样品的结构。