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烟粉虱Bemisia tabaci(Gennadius)是广泛分布于世界各地的一种多食性害虫,上世纪九十年代其生物型B随花卉以及其它贸易活动传入我国,并逐渐蔓延成灾,对我国棉花、蔬菜及园林观赏植物的生产造成严重的威胁。如何有效而持续地控制烟粉虱的危害和蔓延,已成为农业生产上急需解决的实际问题。本论文即以烟粉虱以及与其同域发生的捕食性天敌为研究对象,以SCAR标记技术和FQ—PCR技术相结合,定量评价捕食性天敌对烟粉虱的控制作用。研究结果如下: 一、国内首次运用SCAR标记技术研究捕食者-猎物间的关系 1.建立了天敌对烟粉虱捕食作用的SCAR标记检测体系。运用SCAR标记技术,克隆、测序得到烟粉虱特异性片段(347bp,Genbank登录号为AY841800),根据此基因序列设计烟粉虱特异性引物1对(T-F/T-R 94585);相关物种特异性检验结果表明,该引物只对烟粉虱具有扩增效果,对同域其它相关种类不具有扩增能力;同时该引物对烟粉虱的各个虫态具有相同的扩增效果。 2.明确了棉田烟粉虱捕食性天敌主要类群。棉田捕食性天敌的检测结果表明,在棉田对烟粉虱具有控制作用的主要捕食性天敌有:龟纹瓢虫幼虫、异色瓢虫幼虫、蜘蛛类、东亚小花蝽以及草蛉类等,其种群阳性检出率分别为:96.30%、81.25%、81.82%、66.67%、62.07%。 二、国内外首次将实时荧光定量PCR(FQ-PCR)技术应用于捕食者-猎物关系的研究 1.建立了烟粉虱捕食性天敌定量检测标准曲线,优化了反应条件及反应体系,检验了TaqMan探针的检测灵敏性。 2.探明了取食数量和消化时间与龟纹瓢虫捕食烟粉虱效能检测敏感性的关系。结果表明:龟纹瓢虫取食不同数量的烟粉虱(1、2、4、8、16头拟蛹)荧光信号强度不同,其相关关系式为Y=0.0718X+3.5058(R~2=0.9701);龟纹瓢虫取食10头烟粉虱拟蛹后消化时间(0、1、2、4、8h)不同荧光信号强度亦不相同,其相关关系式为