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目的探讨高热预处理(HPC)对过氧化氢(H2O2)所致大鼠嗜铬细胞瘤株(PC12)细胞氧化应激损伤的影响。方法体外培养PC12细胞,将细胞分组:Control组,常规培养作为对照;HPC组,将细胞置于42℃,5%CO2的培养箱中1h,恢复常规培养;H2O2组,H2O2作用1h诱导细胞损伤;(HPC+H2O2)组,细胞置于培养箱中42℃,1h高热预处理后18h,再以H2O2作用1h诱导细胞损伤。MTT法测定细胞活力,乳酸脱氢酶(LDH)法检测细胞损伤,流式细胞术分析细胞凋亡。结果与Control组相比,H2O2引起PC12细胞活力下降(MTT值1.28±0.23, 0.64±0.18,P<0.01),LDH释放量增多(82±4, 340±20,P<0.01),凋亡明显;而预先行HPC,再给予H2O2作用的细胞与单纯H2O2处理的细胞相比,则表现为MTT值升高(0.64±0.18,0.89±0.10,P<0.05),LDH释放量减少(340±20, 290±18, P<0.05),且没有出现明显凋亡。结论高热预处理(HPC)对H2O2所致PC12细胞氧化应激损伤产生保护作用。目的从细胞和蛋白水平,探讨高热预处理(HPC)对PC12细胞氧化应激损伤保护作用是否由热休克蛋白70(HSP70)表达上调所介导。方法体外培养PC12细胞,将细胞分组:Control组,常规培养作为对照;HPC组,将细胞置于42℃,5%CO2的培养箱中1h,恢复常规培养至24h;H2O2组,常规培养18h后,H2O2作用6h诱导细胞损伤;(HPC+H2O2)组,细胞置于培养箱中42℃,1h高热预处理后18h,再以H2O2作用6h诱导细胞损伤。各组细胞不同处理后24h,于倒置显微镜下观察细胞形态学改变摄像并用western blotting方法分析胞内HSP70含量变化。另外,独立检测PC12细胞经HPC后不同恢复时间胞内HSP70含量变化,观察HPC后胞内HSP70含量变化的时间过程。结果①各组细胞不同处理后24h,与Control组细胞相比,单纯H2O2处理6h的PC12细胞数目明显减少,形态不规则,折光性差,部分细胞呈裂解状态。而HPC18h后再行H2O2处理6h的PC12细胞则状态明显改善,与单纯H2O2处理细胞相比,不但细胞数目较多,而且细胞形态较完整,折光性好。②在镜下观察细胞形态学改变的同时,相同处理的细胞经western blotting方法分析HSP70表达,结果发现(HPC+H2O2)组细胞HSP70表达明显上调,而单纯H2O2组细胞HSP70表达量很低。③独立检测PC12细胞内HSP70含量变化的时间过程发现,HPC后3h-6h,HSP70表达迅速上调,并维持高水平24h-42h。联系第一部分的实验结果,细胞在HPC18h后,经历H2O2氧化应激损伤后24h,始终伴随着HSP70的高水平表达。结论高热预处理(HPC)诱导热休克蛋白70(HSP70)表达上调对PC12细胞氧化应激损伤产生保护作用。