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哺乳动物的卵泡发育是一个复杂的动态变化的过程,在一个发情周期中,卵泡发育成熟排卵,之后形成黄体的过程是在多种激素、生长因子和细胞因子作用下完成的,卵泡发育过程中,多数卵泡会由于优势选择而闭锁,只有少量的卵泡发育成熟直到排卵,而卵泡的闭锁过程实际上就是卵泡内颗粒细胞的凋亡过程。研究表明,内质网应激(ER stress)相关分子伴侣参与调节卵泡的发育过程并起到重要的作用,然而其具体的作用机制仍不明确。CREBZF/Zhangfei(SMILE-L/SMILE-S)是在研究宿主细胞因子HCF-1时发现的一种碱性亮氨酸拉链(basic region leucine zipper,bZIP)转录因子,早先的研究发现CREBZF在哺乳动物体多数组织中均有表达,并参与调节生理、病理过程。研究表明CREBZF/Zhangfei能够与多种内质网应激相关蛋白相互作用,对调控内质网应激起到重要作用。本研究利用免疫组化、干扰慢病毒技术、RT-PCR、Western Blot、流式细胞术等方法对CREBZF/Zhangfei在不同发育时期的小鼠卵巢中的表达定位和表达规律进行检测,并深入研究了CREBZF/Zhangfei对小鼠卵泡颗粒细胞凋亡的影响,得到以下结果:(1)CREBZF/Zhangfei定位于小鼠卵巢卵泡中,在不同发情时期的小鼠卵巢中,CREBZF/Zhangfei在发情前期和发情期的表达量高,而在发情间期和发情末期的表达量低。另外,在促性腺激素处理不同时间的未性成熟雌性小鼠的卵巢中,CREBZF/Zhangfei也存在一定的表达规律。(2)通过慢病毒包装技术,得到针对CREBZF/Zhangfei基因的过表达和干扰慢病毒,能够成功转导颗粒细胞并稳定表达,显著提高或抑制CREBZF/Zhangfei的蛋白翻译水平,干扰效率在70%以上。(3)利用人工诱导和抑制CREBZF/Zhangfei表达的原代小鼠卵泡颗粒细胞模型进一步检测细胞凋亡情况和内质网应激相关蛋白、MAPK信号途径蛋白、线粒体途径凋亡相关蛋白发现,诱导CREBZF/Zhangfei能够促进CHOP、GRP78、BAX、actived-Caspase-3的表达并抑制ERK的磷酸化和BCL-2的表达从而诱导颗粒细胞凋亡,反之抑制CREBZF/Zhangfei能够促进ERK的磷酸化和BCL-2的表达并抑制CHOP、GRP78、BAX和actived-Caspase-3的表达从而抑制凋亡。综上,本次研究通过体内外试验检测CREBZF/Zhangfei对卵泡发育的影响,为研究CREBZF/Zhangfei对小鼠卵泡颗粒细胞凋亡的调控作用提供了试验数据,为深入研究卵泡发育的调控机制奠定了基础。